shRNA/miRNA/gRNA rAAV生产全方位服务，中等规模

特征：
-在大多数细胞类型（包括分裂细胞、非分裂细胞或原代细胞）中具有优异的基因传递效率。
-多血清型（AAV-1、AAV-2、AAV-3、AAV-4、AAV-5、AAV-6、AAV-8、AAV-9、AAV-DJ/8和AAV-DJ）.
-持续转基因表达。
-诱导有效的基因沉默。

用于构建具有特定启动子和报告子的AAV顺式质粒的大型shRNA/miRNA/gRNA AAV顺式载体清单：

服务说明：
1.合成shRNA并克隆到AAV中顺式向量。
2.中等的AAV·HT的规模转染™ 将293个单元放入1xcell堆栈中。
3.收获rAAV粒子，然后通过先进的2xCsCl超离心纯化，获得rAAV载体的临床试验等级。
4.通过qPCR进行rAAV滴定。

我们提供的rAAV血清型：
AAV-1、AAV-2、AAV-3、AAV-4、AAV-5、AAV-6、AAV-7、AAV-8、AAV-9、AAV-PHP.B、AAV-PHP.eB、AAV-DJ/8和AAV-DJ.

所需材料：NCBI登入#，靶序列，验证的siRNA或验证的shRNA序列；miRNA加入、前miRNA、成熟miRNA或TuD（硬诱饵）miRNA。

周转时间：3.~4周。

可交付成果：>0.2ml超纯活体级大于1E+13 VG/mL时的rAAV矢量*.

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图1.来自不同来源的rAAV载体纯度和传染性的比较，显示通过我们先进的双CsCl超离心方法制备的超纯化和超传染性（接近临床试验级）rAAV载体。
A.来自不同来源的rAAV载体（每个通道的总1E+9 VG）在SDS-PAGE上解析，然后进行银染。通道1：GMP从CHOP制造的rAAV载体；通道2：通过我们先进的2xCsCl超离心方法制备的rAAV；通道3：来自BCM载体核心的rAAV；通道4：来自我们竞争对手“V”的rAAV；第5道：来自竞争对手“C”的rAAV；第6道：蛋白质标记。
B.通过先进技术制备的超级传染性rAAV载体双CsCl超离心. 左面板：我们的竞争对手“V”的rAAV9 GFP（总5E+9 VG）注入小鼠眼睛；右面板：rAAV-9-GFP（总5E+9 VG）通过高级2xCsCl纯化超离心注射到小鼠眼睛。


图2.来自不同来源的rAAV载体传染性的比较显示，通过先进的双CsCl超离心方法制备的超纯化rAAV具有超传染性。
将来自不同来源的rAAV1 GFP（总2E+9 VG）注射到小鼠肌肉组织中。注射后3周观察到GFP荧光。A.来自我们的竞争对手“V”的rAAV1 GFP；B.来自我们的预制rAAVs库存的rAAV1 GFP，通过高级纯化双CsCl超离心。定量数据显示，我们的超纯化rAAV（bar 2）的传染性是通过常规CsCl超离心制备的（bar 1）的约9倍。

*最终的病毒产量可能取决于转基因的性质。