描述
DNA GenJet�在体外预先优化了C6胶质瘤细胞转染试剂，用于转染C6胶质瘤细胞．C6胶质瘤细胞系是神经生物学研究中广泛应用的细胞系。与原代神经细胞相比，C6细胞系具有易获得性和培养性以及高细胞数量的可用性等主要优点。然而，C6细胞最大的缺点是常用的非病毒转染方法难以转染。预先优化的转染试剂简化了C6细胞的转染。超过60%的转染效率可以很容易地达到高于90%的细胞存活率。
为使C6胶质瘤细胞转染效率最大化，参照以下最佳转染条件。GenJet试剂，1.0 ml, 24孔板300 ~ 600转染，6孔板150 ~ 300转染。
最佳转染条件总结:
在转染当天进行融合
细胞培养条件
GenJet: DNA(�g)比例
DNA稀释剂和转染试剂
形成GenJet复合物的孵化时间
转染过程中血清/抗生素的存在
转染后更换培养基
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
~ 80%
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
3：1
无血清DMEM，含4.5 g/L葡萄糖
15分钟RT
是的
是的，转染后5小时左右
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
60％
|
储存条件
4欧元。如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间
数据表
