描述
DNA GenJet�在体外转染试剂预优化C2C12细胞转染C2C12细胞。C2C12细胞最初由Yaffe和Saxel(1977)通过选择性连续传代从挤压伤后70小时的C3H小鼠的大腿肌肉培养成肌细胞获得。这些细胞被证明具有分化能力。C2C12细胞是研究非肌细胞向骨骼肌细胞分化的有用模型(如肌球蛋白磷酸化机制)，表达肌肉蛋白和雄激素受体(AR)。
参考以下最优转染条件，使C2C12细胞转染效率达到最高。GenJet试剂，1.0 ml，足够在24孔板中进行300 - 600次转染，或在6孔板中进行150 - 300次转染。
切片细胞转染的最佳条件总结:
细胞培养基
剃须当天细胞的一致性
电镀电池密度
GenJet�(�l): DNA(�g
DNA稀释剂和转染试剂
形成GenJet /DNA复合物的孵化时间
转染复合物的细胞切片孵育时间
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
95 ~ 100%
1.3x10^5细胞每平方centimeter
4:1
无血清DMEM与4.5 g/L葡萄糖
在RT待12分钟
在37度的温度下待20分钟
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
65％
|
储存条件
4欧元商店。如果储存得当，该产品可以稳定12个月或更长时间
数据表
