描述
GenJet� 脱氧核糖核酸体外MCF 10A细胞的转染试剂预先优化,用于转染非肿瘤性上皮细胞系,MCF 10A.MCF 10A细胞系是一种非致瘤性上皮细胞系。这些细胞对上皮唾液胶蛋白、细胞角蛋白和乳脂球抗原呈阳性反应。它们在胶原蛋白中呈现三维生长,并在融合培养物中形成圆顶。到目前为止,这些细胞还没有显示出终末分化或衰老的迹象。该品系对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子(EGF)有反应。通过电子显微镜观察,细胞显示管腔导管细胞的特征,但不显示肌上皮细胞的特征。利用我们专有的转染助推器接合技术,该试剂被配制成转染MCF 10A效率高达50%的细胞(绿色荧光蛋白阳性细胞)。
最佳刮除细胞转染条件总结: 细胞培养基 剃须当天的细胞融合 电镀槽密度 GenJet� (�l) :DNA(�g) 比例 DNA稀释剂和转染试剂 形成GenJet的孵化时间�/DNA复合物 转染复合物去除细胞的孵育时间 最大效率
转染结果: 报告基因 质体 效率(GFP%) |
DMEM/F12含5%HS和其他添加剂 95~100% 每平方厘米1.3x10^5个电池百分表 4:1 无血清DMEM/F12 RT时15分钟 37度20分钟 48小时
表皮生长因子 pEGFP-N3(巨细胞病毒启动子) 50%
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储存条件
4号店�C.如果妥善储存,产品可稳定12个月或更长时间
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