描述:
GenMute�siRNA转染试剂的PMG是预先优化的转染siRNA初级巨噬细胞．巨噬细胞是组织中的白细胞，由单核细胞分化产生。单核细胞和巨噬细胞是一种吞噬细胞，它们既参与脊椎动物的非特异性防御(先天免疫)，也参与启动脊椎动物的特异性防御机制(适应性免疫)。它们的作用是吞噬(吞噬然后消化)固定或移动细胞的细胞碎片和病原体，并刺激淋巴细胞和其他免疫细胞对病原体作出反应。通过流式细胞术或免疫组织化学染色，特异性表达CD14、CD11b、F4/80(小鼠)/EMR1(人)、溶菌酶M、MAC-1/MAC-3和CD68等多种蛋白。
尺寸和内容:
试剂，1.0 ml，在24孔板中转染25 pmol siRNA或miRNA模拟物，足以进行约833次反应
—转染缓冲液(5x)，配制为最大转染效率，8.0 ml制成40 ml工作液
参考以下最佳转染条件，以最大限度地沉默原代巨噬细胞。试剂1.0 ml, 24孔板约833次转染，6孔板约416次转染。
最佳转染条件总结:
细胞培养基
转染当天细胞的连通性
最优核浓度
siRNA稀释剂和GenMute�试剂
培养时间形成GenMute�/siRNA复合物
最大沉默效率
转染结果:
报告基因
静音效率(%) |
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
~ 90%
50纳米
1 xgenmute�转染缓冲区
~15分钟
48小时
Renilla荧光素酶
８５％
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储存:
4欧元。如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间。
数据表和协议
