—体外转染试剂盒(版本II)
描述:
基于我们创新和专有的脂质偶联技术,LipoJet™转染试剂盒,从新型含氟阳离子脂质显示出oth的显著优势市场上的er脂质转染试剂。LipoJet™ 转染试剂盒是最强大但非常温和的基因传递工具,适用于多种应用,包括大多数哺乳动物细胞类型的质粒DNA和/或siRNA。C与市场上的主导产品相比,LipoJet™ 更多具有成本效益,并始终提供较高的转染效率和较少的细胞毒性。
工具包内容:
LipoJet™试剂,1.0 ml,足够进行1000次DNA转染和1000次siRNA转染(24孔板)。
- LipoJet™转染缓冲液(5x), 8.0 mL,制作40ml工作液(1倍)。
特征:
-用途广泛:DNA转染、siRNA转染和DNA/siRNA共转染。
-强大的:对贴壁细胞有卓越的功效。
-极低毒性:转染后提高细胞活力
-经济:用更少的试剂进行更多转染
-易于使用:一管反应,与血清/抗生素兼容。
—适用于高吞吐量应用
存储:
4号店�C代表�LipoJet的试剂和RT;�转染缓冲液(5倍).如果储存得当,产品可以稳定12个月或更长时间。
哺乳动物细胞类型的广谱转染
细胞系 |
DNA转染 |
siRNA转染 |
293293T 3T3,NIH 3T3 3T3-L1 A549 B16-F10 BNLCL.2 C2C12 C3H/10T1/2 碳酸钙-2 大鼠原发性心肌细胞 赵 COS1 COS7 人膀胱癌细胞 mES iMEF HBEC HCT116 希拉 HepG2 HT-29 哈-7 LNCaP MC3T3-E1 MCF10A MCF7 MDA-MB-231 MDCK MEF 人类主要的黑色素细胞 人原发性黑色素瘤 人类不灭的小胶质 mIMCD-3 MRC-5 N2A 生物 原始264.7 RPE SH-SY-5Y SK-OV-3 U-2OS 维罗 人胚胎干细胞 |
85% 65% 30% 80% 75% 55% 80% 60% 20% 10% 80% 70% 75% 80% 50% 55% 45% 75% 80% 60% 45% 45% 45% 50% 40% 50% 50% 20% 50% 50% 50% 50% 50% 50% 68% 70% 45% 30% 75% 70% 80% 40% 70% |
- 20 nM时90% - 10纳米时为90% - - 10纳米时为90% - 20纳米时为80% - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 在30纳米时为85% 在30纳米时为85% - - - - - - - - 在25纳米时为90% - - - 40纳米时为90% |
显示LipoJet的优秀DNA和siRNA转染效率的示例™ 体外转染试剂盒
LipoJet的效率比较™ 用于转染Hela、Cos-7、NIH-3T3、CHO和HEK293(左面板)和Cos-7(右面板)的试剂与品牌产品。pEGFP-N3 cDNA(0.5µg/孔24孔板)在制造商推荐的血清(10%FBS)和抗生素存在下,按照标准转染方案转染到不同的哺乳动物细胞中。转染48小时后通过流式细胞仪分析转染效率。
LipoJet的毒性比较™ 转染Hela细胞的试剂与品牌产品。pEGFP-N3 cDNA(1.0µg/孔24孔板)在制造商推荐的血清(10%FBS)和抗生素存在下,按照标准转染方案转染到Hela细胞。MTT法(右图)和相位对比成像法(左图)用于分析转染后48小时的细胞活力。
LipoJet™试剂与Lipofectamine 2000 (L2K)和PolyJet™转染试剂在HEK293T细胞上的比较。pEGFP-N3 cDNA(0.125µg/孔、0.25µg/孔和0.5µg/孔24孔板)在血清(10%FBS)和LipoJet存在下,使用标准转染方案转染到293T细胞™ (LipoJet处的上面板™/DNA(µl/µg)比值=2),L2K(中间图atl2k/DNA(µl /µg)ratio=3)和PolyJet™(下面板位于PolyJet™/ DNA(µl /µg)比率分别为3)。转染48小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞。
LipoJet™试剂与Lipofectamine 2000 (L2K)和PolyJet™转染试剂在Hela细胞上的比较。采用LipoJet™在血清(10%胎牛血清)存在的情况下,采用标准转染方案将pEGFP-N3 cDNA(0.125µg/孔、0.25µg/孔和0.5µg/孔24孔板)转染至Hela细胞(LipoJet上面板)™/DNA(µl/µg)比值=2),L2K(中间图atl2k/DNA(µl /µg)ratio=3)和PolyJet™(下面板位于PolyJet™/ DNA(µl /µg)比率分别为3)。转染48小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞。
在哺乳动物细胞DNA/siRNA共转染过程中,LipoJet™试剂异常的基因沉默。用LipoJet转染GFP cDNA(左图,每孔24孔板0.25µg)和共转染GFP cDNA(每孔24孔板0.25µg)和GFP靶向siRNA(最后10 nM,右图)™ 试剂分别导致HEK293(上面板)、Hela(中面板)和SaoS-2(下面板)细胞上异常的基因沉默。转染48小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞。
HUVEC的DNA/siRNA共转染效率极高。用LipoJet将McHery cDNA(0.10µg/孔24孔板)和FITC结合siRNA(最后30 nM/孔24孔板)共转染到HUVEC™ 转染24小时后,试剂产生60%的mCherry+(相衬度与mCherry成像重叠,左图)和近100%的FITC-siRNA+(相衬度与FITC成像重叠,右图)HUVEC。这些照片是南加州大学的潘刚博士出于礼貌拍摄的。
使用LipoJet在HEK293(上面板)和Hela(下面板)细胞中对内源性表达的KIF11(也称为EG5)进行极好的沉默™试剂在10 nM EG5 siRNA。KIF11(也称为EG5)编码一种运动蛋白,属于驱动蛋白样蛋白家族,参与细胞有丝分裂期间染色体定位和双极纺锤体形成。KIF11水平的降低导致有丝分裂停止。LipoJet™ 试剂有效地将EG5 siRNA(最后10 nM)递送至HEK293和Hela细胞,导致转染24小时后HEK293和Hela细胞80%以上的“取整”表型超过阴性对照(最后10 nM为假EG5 siRNA)。转染24小时后,在尼康显微镜下观察“取整”HEK293和Hela细胞的表型。
图像显示LipoJet异常转染效率-转染试剂盒在…上人胚胎干细胞(HESC)。的hESCs在Geltrex上E8培养基上生长vs(左面板,DIC成像)转染pEF1αgfp。转染24小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察GFP表达(右图)。以上图片由博士玛丽娜Pryzhkova约翰·霍普金斯大学的礼节
数据表和协议:
-DNA和siRNA转染方案
-简短的DNA转染协议
-短协议的siRNA转染
-DNA/siRNA共转染方案
-技术说明和转染提示
我们是阿弗林g向购买5x1.0 mL LipoJet的客户提供“无线PowerPoint演示文稿”™ 2014年12月之前。好好利用它,不要错过这个机会。。。
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FG-3:无线PowerPoint演示文稿与案例购买5 X 1.0 ml或更多。此节目只提供有限的时间! |
请索取免费试用样品创建帐户与我们一起输入您的发货地址并发送电子邮件至order@188金宝慱亚洲体育APP下载www.gjp158.com
感言:
抱歉这么晚了,但现在我完全爱上了PolyJet和LipoJet。最近我们发现,LipoJet在转染mESCs和hESCs时具有非常好的转染效率,而且毒性较小。上周,我用LipoJet在一夜之间转染了人ESC细胞株H1,其转染效率同样惊人——高达50~70%。DNA构建包括EF1a启动子下的GFP (CMV启动子在hESCs中不起作用)。这是我见过的最好的干细胞转染效率。脂质体维生素3000没有给我这些结果(在小鼠ESCs上使用)。
--------玛丽娜·普里日科娃博士,朱朱大学
我使用LipoJet样品在EAhy926细胞中尝试了质粒/siRNA共转染,EAhy926细胞是HUVEC细胞系。结果相当不错,至少在转染效率方面是这样。质粒转染48小时后,细胞转导率约为60%。对于siRNA来说,效率几乎是100%。我们正在订购更多的LipoJet试剂。
——博士。潘刚,南加州大学
在293T细胞上,我们使用LipoJet获得了>90%的效率,而使用X-Gene 9获得了80%的效率。我一定会订购更多。。。。
-----Roswell Park癌症研究所的Nuo Yang博士
以下是我们对LipoJet的初步实验结果。我们对它的效率非常满意。不幸的是,我们没有Fugene 6/HD,无法同时测试它们,但根据以前的经验,我们确实相信您的产品工作效率更高。
——博士。匹兹堡大学的艾莉森·麦凯维说
我很高兴地说,我用你们的转染试剂在OKF6/TERT2人角质形成细胞上取得了巨大的成功。一旦我完成分析,我就会把数据整理起来。我真的很喜欢LipoJet。我感兴趣的细胞在GenMute中做得不是很好,尽管我的控制细胞做得很好。我们想尽快开始订货。我也有一个10%的优惠券为一个PO订单。
-----UPMC的Michelle Simpson Abelson博士
我们确实把它们和自制的卡福一起测试过。结果很好,LipoJet和CalFectin都很好。LipoJet是两者中较好的一个。我拿到结果后会发给你,我现在不在实验室,但我们会订购更多的。谢谢你寄来那些样品。
——博士。Ahmed Hassib,康奈尔大学
对于LipoJet,我只将其与Hela细胞中的Lipo LTX进行了比较。转染24小时后,LipoJet的效率要高得多(比Lipo LTX高约35%)。我们要订购一些LipoJet。
-----来自南加州大学的测试人员