LipoD293体外DNA转染试剂

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  • 单位大小:1.0毫升

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LipoD293�DNA体外转染试剂

描述
通过使用我们的创新和专利的脂质结合技术,LipoD293�(Ver。II)是通过添加专用的增强子来特别设计和配制的,用于转染HEK293细胞和其他哺乳动物细胞(图1)。II)对HEK293相关细胞以及许多细胞毒性较小的哺乳动物细胞具有极高的转染效率。LipoD293�试剂(版本。II),从以前的版本升级为精细化学,在基因传递方面效率提高了3~4倍。LipoD293�试剂(版本。II), 1.0 ml,足以在24孔板中转染~666个,在6孔板中转染~333个。

How_LipoD293_Works
图1所示。展示LipoD293的卡通片。II)基因传递增强

特性
-难转染细胞的首选
-病毒生产的滴度异常高
-同样适用于非常长的dna(高达180 kb)
-同样适用于悬浮293细胞(如293F, 293H等)
-高水平的重组蛋白生产
-血清和抗生素的存在提高了对293细胞的效率
-高效的单DNA转染和多DNA共转染
——非常负担得起的

储存条件
售价为4 C。如果储存得当,产品可稳定保存12个月或更长时间。

LipoD293 - DNA在体外转染试剂中转染效率的比较(Ver。II)使用品牌产品
LipoD203_vs_Lipo2000_HepG2
LipoD293试剂转染效率的比较(Ver。II)与lipofectamine 2000 (L2K)和Fugene HD对HepG2细胞的影响。
右图:LipoD293转染效率比较(Ver。II) Lipofecatmine 2000 (L2K)和Fugene HD对HepG2细胞的作用。GFP DNA (pEGFP-N3)用不同的转染试剂转染HepG2细胞(在胶原蛋白预处理的培养皿上培养)。转染48h后通过FACS检测GFP阳性细胞(%)和荧光强度
左图:血清和抗生素增强LipoD293 (Ver。II)对HepG2细胞的效率。HepG2细胞(生长在胶原蛋白处理的培养皿上)在三种不同条件下转染-------血清和无抗生素,转染后5小时去除10%血清和抗生素,转染后5小时去除10%血清和抗生素。

LipoD203_vs_Lipo2000_CHO
LipoD293试剂转染效率的比较(Ver。II)与lipofectamine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6对CHO细胞的影响。
右面板:LipoD293 (Ver。II)与Lipofecatmine 2000 (L2K), TransIT和Fugene 6对CHO细胞。DNA编码的Renilla荧光素酶(phRL-CMV)和GFP (pEGFP-N3)用不同的DNA转染试剂根据制造商的协议进行转染。转染24小时后分别用Renilla Assay System和尼康Eclipse荧光显微镜检测肾荧光素酶活性和GFP荧光。
左面板:LipoD293与Lipofecatmine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6的价格($/1.0 ml /瓶)比较。所有的价格都是从制造商的网站上收集的。

LipoD203_vs_Lipo2000_SMC
LipoD293 -�试剂与lipofectamine 2000 (L2K)对难以转染的大鼠主动脉平滑肌细胞转染效率的比较大鼠主动脉平滑肌细胞制备和pEGFP-N3分别通过LipoD293试剂(左图)和Lipofecatmine 2000 (L2K,右图)转染。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光,以评估转染效率。以上图片由芝加哥大学肺科和重症监护科的Nickolai Dulin医生提供。

LipoD203_vs_FugeneHD_LNCap
LipoD293 -�试剂与Fugene HD对难转染的LNCap细胞的转染效率比较按照ATCC推荐的程序培养LNCap细胞,并根据制造商的协议分别用pBabe-hygro-SSeCKs (1.5ug)和pEGFP-N3 (0.5ug)共转染每孔(6孔板)LipoD293试剂(左图)和Fugene HD(右图)。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光,以评估转染效率。以上图片由罗斯威尔公园癌症研究所的Lyn Gao医生提供。

LipoD203_HepG2_SaoS-2
这两个例子显示了LipoD293试剂对难以转染的细胞如HepG2和SaoS-2的特殊效果。HepG2和SaoS-2细胞95% con流畅性转染pEGFP-N3和pSV-?-半乳糖苷酶dna分别存在于血清/抗生素中。转染48小时后分别用Zeiss 510共聚焦显微镜和-半乳糖苷酶染色试剂盒检测转染效率。

LipoD203_vs_293fectin_HEK293_I
LipoD203_vs_293fectin_HEK293_II

LipoD293 -�试剂与293fectin转染HEK293细胞的效果比较。体外DNA转染试剂(Ver.)二)(上面板)和Invitrogen公司最受欢迎的品牌产品293fectin�(下面板)。转染24小时后,用尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞,左图为DIC相位成像,右图为FITC成像。

LipoD203_vs_293fectin_HEK293_II

LipoD293 -�试剂与293fectin、Xfect和Fugene 6试剂在悬浮细胞293F蛋白生产上的比较30毫升的用LipoD293�体外DNA转染试剂(Ver.)转染标准培养基培养的293F细胞。II) (20 ug质粒DNA), 293Fectin (30 ug质粒DNA), Xfect (30 ug质粒DNA)和Fugene 6 (30 ug质粒DNA)每个制造商的标准转染协议。用A (LipoD293)、B (293fectin)、C (Xfect)和D (Fugene 6)转染48小时后观察GFP荧光(左图)。然后纯化6xHis标记的GFP蛋白
一个Ni-NTAaffinity列。5 ul的第1次洗脱馏分在SDS-PAGE上溶解,然后考马斯亮蓝染色(右上E图),列1为LipoD293,列2为蛋白标记,列3为Xfect,列4为293fectin,列5为Fugene 6。蛋白质产量通过光谱仪定量(右下图F)。

LipoD203_vs_LTX_Lentivirus_Yield_II
LipoD203_vs_LTX_Lentivirus_Yield
编译LipoD293的一个比较。II)和Lipofecatmine LTX (LTX)对慢病毒(LV)产生的影响。将3个cdna与LipoD293共转染。II)和Lipofectamine LTX (LTX)转染293FT细胞。用GFP载体fr - sin -cppt- cmvewp测定LV滴度。将每孔1x105 293F细胞镀到24孔板上,然后分别加入不同数量的载体上清,1微升(上图)和10微升(下图)。5 d后流式细胞仪通过细胞。右上角的数字表示转导细胞的百分比。LipoD293�和L2K生成的LV滴度分别为8x10^6和3x10^6 tu/ml

技术资料和数据表
-LipoD293�(版本。II)试剂通用规程及数据表

-LipoD293�(版本。II)试剂短方案
-LipoD293�(版本。II)悬浮293细胞和CHO细胞转染试剂方案

-LipoD293�(版本。II)慢病毒生产试剂

-LipoD293�(版本。二)生产rAAV试剂
-技术说明和转染提示



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奖状
我对LipoD293转染试剂非常激动!我比较了LipoD293和Lipofectamine转染质粒产生病毒假颗粒和WOW!我用LipoD293试剂发现的病毒比Lipofectamine多4倍!!这对我和我的导师来说是一个好消息,因为这意味着我不需要花费那么多的时间(和资源)转染293T细胞来恢复病毒用于体外实验。我的导师也很高兴LipoD293比Lipofectamine便宜很多!!我们已经订购了5毫升的LipoD293,我已经说服了我的实验室同事改用LipoD293,因为我用它取得了很好的效果。谢谢你做了这么好的产品!
--------克里斯蒂·拉文,哈佛大学博士

我想更新一下你寄给我们的LipoD293的免费样品。我最近用Lipofectamine 2000并排转染了一些plate - e,你们的产品比它更好!!我们也在用HeLa细胞来验证它,但除此之外,我们对目前为止所看到的一切感到非常满意!谢谢你寄给我们免费的样品,这对我们的生意很有帮助!
--------凯瑟琳·加洛博士,辛辛那提大学

我们已经在293FT细胞上尝试了LipoD293 DNA体外转染试剂。在第一个瓶中,我们使用了Invitrogen公司提供的Virapower盒插入物(Virapower, pBABE-GFP质粒,加上Lipofectamine)。在第二个烧瓶中,我们使用LipoD293 (30 ul/6ml培养基),与第一个烧瓶中相同数量的Virapower和质粒。结果令人震惊:LipoD293提供的转化子是Lipofectamine 2000的两倍……
--------来自韦恩州立大学的测试员



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