�siRNA转染试剂

描述:
试剂是一种新型的可生物降解非脂质体siRNA/miRNA和DNA传递工具。与我们的专有依赖pH的构象变化(采用PDCC)技术，将预筛选的疏水性基团加入到其侧链中，制备出可生物降解转染试剂GenMute�试剂市场上最强大的多功能基因传递工具。GenMute�试剂已被证实有效且可重复转染单个siRNA/miRNA或共转染DNA/siRNA或DNA/miRNA到多种哺乳动物细胞。

尺寸和内容:
试剂，1.0 mL，在24孔板中转染5.0 pmol siRNA或miRNA模拟物，足以进行约2000次反应。
—转染缓冲液(5x)，配制为最大转染效率，8.0 mL制作40ml工作液。

应用程序:
-单一siRNA转染或DNA/siRNA共转染多种哺乳动物细胞。
-单个miRNA, miRNA模拟或抑制转染或DNA/miRNA或DNA/miRNA模拟多种哺乳动物细胞共转染。

储存:
4欧元GenMute�试剂及RTGenMute�转染缓冲液(5x)．如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间。

优点:
-仅使用1.0 nM siRNA / miRNA模拟物，在低浓度下具有良好的沉默效果
-最小化细胞中的非特异性和脱靶效应
-单管反应
-最适合哺乳动物细胞
-极低的细胞毒性
——非常负担得起的

GenMute - siRNA和DNA转染试剂与名牌产品的沉默效果比较

�4 siRNA转染试剂(中图)和Lipofectamine�2000(下面板)在HEK293细胞。根据上述三种转染试剂的不同厂家的协议，以0.5 - 20 nM不同终浓度的renilla荧光素酶为靶标的siRNA与renilla荧光素酶基因(每孔0.5�g pRL-CMV DNA)共转染到生长在24孔板上的HEK293细胞中。用Renilla荧光素酶测定系统(Promega)共转染24h后测定Renilla荧光素酶活性。用Beckman Coulter LD 400荧光计测量5.0 - l裂解液在10秒内的发光。荧光素酶活性以10秒以上的集成单位(RLU)表达，并通过BCA法归一化每mg细胞蛋白。误差条代表从三次重复实验中得到的标准偏差。相对于未处理细胞计算荧光素沉默效率。而GenMute�和Dharmafect�4试剂对1.0 nM的renilla荧光素酶siRNA进行了显著的基因沉默pofectamine - 2000仅在30 nM后给予良好的击倒(数据未显示)。


用0.5�l GenMu对HEK293细胞内源性表达的KIF11(也称为Eg5)进行良好的沉默24孔板每孔含5.0 pmol Eg5 siRNA。KIF11(也称为Eg5)编码一种运动蛋白，属于在细胞有丝分裂过程中参与染色体定位和双极纺锤体形成的激酶样蛋白家族。KIF11水平的降低导致有丝分裂停止。GenMute�试剂有效地递送Eg5 siRNA(最后10 nM，右图)到HEK293细胞，与阴性对照(最后10 nM)相比，每孔24孔板仅0.5�l。左面板)。与阴性对照(左图)相比，尼康显微镜观察了转染24小时后的293细胞的表型(右图)。


转染试剂敲除Hela细胞内源性层蛋白A/C基因表达。将靶向层蛋白A/C基因的siRNA(右图)和假siRNA(左图)导入Hela细胞(最终1.0 nM)GenMute�转染试剂。l免疫荧光法检测转染24h后amin A/C基因沉默情况。用小鼠单克隆层蛋白A/C特异性抗体检测层蛋白A/C，然后加入fitc偶联的抗小鼠抗体。定量分析表明在Hela细胞中，转染试剂在1.0 nM时敲除94%内源性表达的lamin A/C。

数据表和协议
-siRNA转染和DNA/siRNA协同转染的协议
-miRNA模拟转染和DNA/miRNA共转染的协议
-哺乳动物细胞DNA转染方案

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