描述
DNA GenJet�在体外预先优化了COS细胞转染试剂细胞转染。COS是生物学家在研究猴病毒SV40时经常使用的细胞系。它也常用于转染细胞以产生重组蛋白，用于分子生物学、生物化学和细胞生物学实验。常用的两种COS细胞系是COS-1和COS-7。COS细胞系是通过将非洲绿猴肾细胞的细胞系永化而获得的，该细胞系具有SV40基因组，可以产生大T抗原，但基因组复制存在缺陷。
为使COS-1和COS-7细胞转染效率最大化，请参考以下最佳转染条件。GenJet试剂，1.0 ml, 24孔板300 - 600转染或6孔板50 - 100转染足够。
最佳转染条件总结:
在转染当天进行融合
细胞培养条件
GenJet: DNA(�g)比例
DNA稀释剂和转染试剂
形成GenJet复合物的孵化时间
转染过程中血清/抗生素的存在
转染5小时后更换培养基
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
~ 90%
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
3:1
无血清DMEM，含4.5 g/L葡萄糖
15分钟RT
是的
没有
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
88％
|
储存条件
4欧元。如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间
两个图显示GenJet转染效率-试剂分别对COS-1(上面板)和COS-7(下面板)细胞．在ATCC推荐的培养基上培养COS-1细胞，用GenJet�转染pEGFP-N3。转染后24小时检测效率
数据表
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