描述
DNA GenJet�在体外转染试剂L929电池预先优化反式谈吐L929细胞。L929是一种小鼠非整倍体纤维常用于测定tnf - α和tnf - β的肉瘤细胞系。TNF治疗可引起细胞凋亡和随后的细胞死亡。检测水平在50 pg/mL左右。另一种敏感约5-10倍的细胞株是WEHI-164。已经开发了一些L929亚克隆,可以检测浓度约为30 pmol/L(约500 fg/mL)的TNF。苏也建立了对TNF具有抗性的bline。
为使L929细胞转染效率最大化,参照以下最佳转染条件。GenJet试剂,1.0 ml, 24孔板300 ~ 600转染,6孔板150 ~ 300转染。
最佳转染条件总结: 在转染当天进行融合 细胞培养条件 GenJet: DNA(�g)比例 DNA稀释剂和转染试剂 形成GenJet复合物的孵化时间 转染过程中血清/抗生素的存在 转染后更换培养基 最大效率
转染结果: 报告基因 质粒 效率(GFP %) |
~ 80% DMEM加4.5 g/L葡萄糖,10%胎牛血清 3:1 无血清DMEM,含4.5 g/L葡萄糖 15分钟RT 是的 是的,转染后5小时左右 48小时
EGFP pEGFP-N3 (CMV启动子) 65%
|
储存条件
4欧元。如果储存得当,产品可以稳定12个月或更长时间
数据表