正如基因治疗最终似乎实现了它的承诺一样，一项研究重新唤起了人们对病毒载体的长期担忧，许多人依靠这种载体将治疗基因运送到患者体内。这种“载体”是腺相关病毒（AAV）的一种精简版本，被认为是安全的，因为它很少将携带的人类DNA编织到细胞染色体上，在那里它可能激活致癌基因。但一项对血友病犬的研究表明，在10年前用AAV治疗后，该载体可以很容易地将其有效载荷插入宿主DNA中控制细胞生长的基因附近。
上个月由基于费城的研究团队的会议谈话中描述的新数据是“好消息和坏消息”，国家人类基因组研究所的Charles Venditti Gene Theripe Charles Venditti说。通过滑入染色体而不是自由漂浮，治疗DNA可能具有更长的效果。Integration “happens and it may actually be essential for long-term expression” of a needed protein, says physician-scientist David Lillicrap of Queen’s University, who attended the 9 December 2019 talk at the annual meeting of the American Society of Hematology (ASH) in Orlando, Florida. But the findings also fuel a debate about whether AAV vectors could pose an unacceptable cancer risk. “We don’t know enough yet” to say, according to Lillicrap.
在一些早期基因治疗试验中使用的另一种病毒载体，在将其产物整合到染色体中后，在少数儿童中导致癌症。AAV似乎是一种更安全的选择，因为被修饰的病毒引入的基因通常在细胞核中形成一个自由浮动的环，称为上位体。AAV载体帮助推动了最近成功的基因治疗的激增。其中包括去年美国食品和药物管理局批准的一种治疗脊髓性肌萎缩症（一种致命的儿童神经系统疾病）的药物，以及一种治疗凝血障碍血友病a的药物，预计今年将获得FDA批准。在血友病治疗中，AAV感染肝细胞，并将肝细胞转化为制造患者所依赖的凝血蛋白的工厂。
然而，对AAV安全性的怀疑已经酝酿了近20年，因为一项研究发现，在给予高剂量病毒的新生小鼠中，AAV可能将其基因产物整合到动物的DNA中，并导致肝癌。许多基因治疗师认为，新生小鼠的发现与成人无关。但新的警告来自更大、更老的动物：患有血友病A的成年狗，其中一种叫做凝血因子VIII的凝血蛋白缺失。
在九只这样的狗中，AAV载体成功地提供了基因的替代副本，用于因子VIII并恢复稳定的分子生产。然而，在两只狗中，血液水平在大约3年后进一步升高，达到原始水平的大约7至8年，基因治疗研究员丹尼斯在审计的费城儿童医院的Sabatino。
在结束实验并研究了六只狗的肝脏后，她的研究小组发现，在每只狗身上，AAV都携带了第八因子基因的DNA，或者更常见的是，调节序列的片段-在狗肝细胞中的基因组中综合体内综合，有时接近基因影响细胞生长．其中一些细胞比其他细胞分裂得更多，在一些动物中形成多个细胞囊或“克隆”。Sabatino的团队怀疑——虽然不能证明——插入激活了生长基因，解释了克隆和两种狗血液中因子VIII水平的上升。(萨巴蒂诺拒绝讨论调查结果，因为结果尚未发表。)
对一些研究人员来说，结果令人鼓舞:整合水平相对较低，狗的肝脏看起来很健康，它们的因子VIII水平保持稳定。圣裘德儿童研究医院(St. Jude Children’s Research Hospital)的安德鲁·大卫多夫(Andrew Davidoff)说:“我不认为有什么太出乎意料的事情。”该医院赞助了首例成功的B型血友病患者基因治疗试验，该试验也使用了AAV载体。事实上，AAV的治疗DNA的整合可以解释为什么在试验的患者中凝血蛋白水平在9年后呈现稳定。相反，在细胞分裂中携带的DNA会随着时间的推移而丢失，因为只有一个子细胞会继承替代基因。
但是，基因治疗领域的其他人担心，此类克隆获得另一种生长驾驶突变并成为肿瘤的时间只是时间问题：“如果狗居住了5年怎么办？”Venditti问道。一些研究人员表示，这种风险可能在肝脏中产生，而是在靶向AAV治疗的其他组织中，一些研究人员说。
S.abatino’s data give new urgency to plans to look for integration of AAV-carried genes in other long-term dog studies and in planned liver biopsies from the St. Jude hemophilia patients, says Lillicrap, who is now studying this in his own colony of nine dogs. Meanwhile, researchers emphasize that people receiving AAV-delivered gene therapy should be monitored for signs of liver cancer for longer than the 5 years of follow-up now required by FDA. A spokesperson for the agency said only that it is “aware of” the Sabatino findings.
*更正，6月19日下午2:50：这个故事的早期版本错误地描述了血友病的类型，基因治疗预计将在2020年获得FDA批准。