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以超高滴度生产超级传染性rAAV颗粒的多种方法:
与腺病毒不同,常规rAAV生产程序相对较难获得高产量的rAAV。通过采用以下多种策略,我们成功地以超高滴度(高达1E+15 GC)生产出超传染性(比传统rAAV的传染性高约30倍)rAAV颗粒。
–AAV·HT™ 包装单元:我们筛选了不同类型的HEK293细胞,并开发了一株高产菌株——AAV·HT™ 根据我们的验证数据,包装单元产生的rAAV颗粒约为常规HEK293的10倍。
–修改rAAV cis向量:客户可以选择带有转基因下游截断的WPRE盒的rAAV顺式载体。在rAAV-cis载体中加入WPRE盒可以产生比不含WPRE的rAAV-cis载体多约8倍的rAAV颗粒。
–修改rAAV衣壳:rAAV衣壳在几个特定位点的突变显著(~30倍)体外&体内)提高rAAV转导效率。客户可以选择使用突变衣壳包装rAAV,以产生更具传染性的rAAV载体。
–成套双绞线AAV(dsAAV):双链AAV(dsAAV)也被称为自互补AAV(scAAV),被证实在这两种病毒中的转导效率高达50倍体外培养活泼地. 定制服务可用于生成感兴趣的基因并将其打包到scAAV载体*。

–高级双CsCl超离心协议:高级方案的主要特点是在冷冻/解冻循环和预沉淀步骤后,在装载至超速离心之前,使用特殊配方的清洁剂进行处理。高级方案以高产量生产超纯化(临床试验级)和超传染性rAAV载体。看见图8详情请参阅。与传统协议的不同之处用红色框起来。


图7。以超高滴度生产超传染性rAAV颗粒的多种方法


高级协议和常规协议的概述和比较。高级协议中的差异用红色框起来。

欲了解更多信息,请访问
http://188金宝慱亚洲体育APP下载www.gjp158.com/AAV-Production-Service
http://188金宝慱亚洲体育APP下载www.gjp158.com/shRNA-miRNA-AAV-Production-Service

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