应用程序:
条带Western Blot用于再次检测和质谱分析
特点:
—5~15分钟内吸干
-室温孵育
-不添加2-巯基乙醇或其类似物，无臭味
-适当配方，采用环保、无害的有机溶剂(气味轻)，完全分离结合抗体
应用一、剥去Western Blot再次检测
BlotFresh - Stripping Reagent与Pierce's Restore - Blot Stripping Buffer的比较
-印迹剥离和重新pro和同样的抗体同床*：
总Akt(目录# A0501-1)与NIH 3T3细胞的不同处理
*使用ECL Plus开发2分钟�在柯达底片上曝光20秒
- BlotFre上海圣�ripping试剂在分解抗原-抗体复合物方面比Pierce的恢复缓冲更有效
BlotFresh�剥离试剂＊皮尔斯的恢复剥离缓冲区＊
原始Expose x 1 'Expose x 5 '原始Expose x 1 'Expose x 5 '
*最初用β-actin抗体检测印迹，暴露10秒。然后分别用BlotFresh�Stripping Reagent和Pierce's Restore�Stripping Buffer剥离印迹5分钟和15分钟。冲洗后，用ECL Plus -�冲洗2分钟的印迹，然后分别暴露在柯达BioMax薄膜下1分钟和5分钟，测试剥离效果
——BlotFresh�溶出试剂条用不同的抗体进行再次检测:
一个。用抗总Akt的抗体进行Blot(目录# A0501-1)*。
B．用BlotFresh�Stripping Reagent剥离印迹，并重新探针针对phospho-Akt的抗体(目录# A0503-1)*。
＊Lane 1为血清饥饿过夜，Lane 2~5为不同浓度PDGF处理NIH3T3细胞。用ECL Plus在2分钟内冲洗印迹�试剂和曝光10秒的柯达负片(ECL +—是通用电气医疗保健的商标)
应用二世。条带Western Blot用于质谱分析
质谱Western Blot的溶出流程:
RT条件下进行15分钟的条形印迹，以去除一抗和二抗
-通过比较剥离的印迹和暴露的薄膜找到蛋白质，并从印迹上剪下条带
-分解切割带，然后进行质谱分析(见下图)
数据表
感言:
.．.接受BlotFresh - Western Blot溶出试剂样品。很棒的产品! !已用于剥离相同的印迹2x，所得到的3张x线片与使用第二两种抗体的原印迹无法区分。我今天要点一些……
NIH国家癌症研究所凯瑟琳·拜尔博士的------
没有它我活不下去!真是太神奇了。我曾经使用皮尔斯，我经常需要重新运行西方由于脏的污渍后，strip。自从我开始使用这个产品，我的生活改变了，它使我的研究更容易，我不需要再重新运行凝胶，剥离过程只有2分钟。这真是一款神奇的产品!
------，乔治华盛顿大学Jennifer Lin博士
一些产品引用:
1.Mahmoud M. El-Mas, Ming Fan和Abdel A. Abdel- rahman。内毒素介导的心脏诱导型一氧化氮合酶表达解释了乙醇对雌性大鼠的降压作用。j .杂志。其他实验。2008;324: 368 - 375
2.Grzegorz Woszczek, Li-Yuan Chen, Sahrudaya Nagineni, Sara Alsaaty, Anya Harry, Carolea Logun, Rafal Pawliczak和James H. Shelhamer。干扰素- γ诱导半胱氨酸白三烯受体2表达并增强人内皮细胞对半胱氨酸白三烯的反应。免疫学杂志, 2007;178: 5262 - 5270
3.David A Baker, Aric Madayag, Lars V Kristianse, James H Meador-Woodruf, Vahram Haroutunia和Ilangovan Raju．胱氨酸谷氨酸反转运体对苯环克林拟精神效应的贡献。神经精神药理学, 2007;8月29日在线出版
4.Ashley B. Williams和Patricia L. Foster。大肠杆菌组蛋白样蛋白HU在固定相适应性突变中发挥作用。遗传学。2007;735年177:723�
