shRNA/miRNA rAAV包装，大规模

特点:
-在大多数细胞类型中，包括分裂细胞和未分裂细胞或原代细胞，具有优良的基因传递效率。
——多个血清型(AAV-1、AAV-2、AAV-3、AAV-4、AAV-5、AAV-6、AAV-8、AAV-9、AAV-DJ/8、AAV-DJ)．
-持久的转基因表达。
-诱导有效的基因沉默。

服务描述:
-大规模共转染AAV HT 293细胞到2xcell stack。
-收获rAAV，然后通过2xCsCl超离心纯化。
-通过qPCR滴定(测量基因组拷贝数)。

我们提供的rAAV血清型:
Aav-1, aav-2, aav-3, aav-4, aav-5, aav-6, aav-7, aav-8, aav-9, aav-php。B, AAV-PHP。eB、AAV-DJ/8和AAV-DJ．

所需材料:
rAAV独联体携带shRNA或pre-miRNA的质粒，>300 � g。

周转时间:
1 ~2周。

可交付成果:>1.0 mL超纯化的体内级rAAV载体>1E+13 VG/mL*。

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图1所示。对不同来源的rAAV载体的纯度和传染性进行了比较，结果显示，通过我们先进的双CsCl超离心方法制备的rAAV载体具有超纯度和超传染性(接近临床试验级别)。
A. SDS-PAGE分离不同来源的rAAV载体(共1E+9 VG / lane)，然后银染色。Lane 1: GMP生产的CHOP rAAV载体;2车道:采用先进的2xCsCl超离心方法制备的rAAV;Lane 3:来自BCM Vector Core的rAAV;第四道:我们的竞争对手“V”的rAAV;5道:我们的竞争对手C的rAAV;第六道:蛋白质标记。
B.通过先进方法制备的超级传染性rAAV载体双中海ultra-centrifugation．左面板:我们的竞争对手“V”注入小鼠眼的rAAV9-GFP(共5E+9 VG);右图:经高级2xCsCl纯化的rAAV-9-GFP(共5E+9 VG)ultra-centrifugation注射到老鼠的眼睛。


图2。对不同来源的rAAV载体的传染性进行了比较，结果表明采用先进的双CsCl超离心方法制备的超纯化rAAV具有超强传染性。
将不同来源的rAAV1-GFP(总2E+9 VG)注射到小鼠肌肉组织。注射后3周观察GFP荧光。A.竞争对手“V”的rAAV1-GFP;B. rAAV1-GFP，来自我们预先制作的rAAVs库存，通过高级纯化中海ultra-centrifugation两倍。C。定量数据表明，我们的超纯化rAAV (bar 2)比常规CsCl超离心制备的(bar 1)传染性高约9倍。

*最终的病毒产量可能取决于转基因的性质。