描述
GenJet� 脱氧核糖核酸体外HuH-7细胞转染试剂针对人类HuH-7进行了预优化赛尔l转染。HuH-7,来源于h人类肝癌,很难转染。利用我们的主要肽接合技术,该试剂可用于转染效率高达70%的HuH-7细胞(GFP阳性细胞)。
参考以下最佳转染条件,以获得对HuH-7细胞的最大转染效率。GenJet� 试剂1.0 ml足以在24孔板中进行300至600次转染,或在6孔板中进行150至300次转染。
最佳转染条件概述: 在转染当天汇合 细胞培养条件 GenJet� (�l) :DNA(�g) 比例 DNA稀释剂和转染试剂 形成GenJet的孵化时间�/DNA复合物 转染期间血清/抗生素的存在 转染后更换培养基 最大效率
转染结果: 报告基因 质体 效率(GFP%) |
~90% 含4.5 g/L葡萄糖的DMEM,10%FBS 3:1 含4.5 g/L葡萄糖的无血清DMEM RT时15分钟 对 是的,转染后约5小时 48小时
表皮生长因子 pEGFP-N3(巨细胞病毒启动子) 80%
|
储存条件
4号店�C.如果妥善储存,产品可稳定12个月或更长时间
显示GenJet转染效率的图片� HuH-7细胞上的试剂
GenJet� 试剂针对HuH-7细胞进行了优化与Lipofectamine 2000(L2K)和Fugene HD相比,具有非凡的效率。按照ATCC推荐的培养基培养HuH-7细胞,并通过GenJet转染pEGFP-N3�. 转染48小时后检查效率
右面板:比较GenJet与Lipofecatmine 2000(L2K)和Fugene HD对HuH-7细胞的转染效率。按照制造商的协议,使用不同的转染试剂将GFP DNA(pEGFP-N3)导入HuH-7细胞。转染后48小时通过流式细胞仪检测GFP阳性细胞百分数和荧光强度
左面板:血清和抗生素的存在提高了GenJet对HuH-7细胞的效率。用三种不同的条件转染HuH-7细胞(生长在胶原处理的培养皿上)——无血清和抗生素,存在10%的血清和抗生素,然后在转染后5小时去除,在转染后5小时不去除10%的血清和抗生素。
GenJet� 试剂针对HuH-7细胞进行了优化.哈-7细胞按照ATCC推荐的培养基在经I型胶原处理的培养皿上生长,并通过GenJet转染GFP cDNA(pEGFP-N3)�. 转染24小时后,通过Nikon Elipse 2000共焦显微镜检查效率
数据表
要索取免费试用样品,请创建帐户与我们一起输入您的发货地址并发送电子邮件至order@188金宝慱亚洲体育APP下载www.gjp158.com