描述
对于CV-1的体外转染试剂的Genjet�DNA预先优化用于转染CV-1细胞。CV-1细胞系于1964年3月开始,从成年男性非洲绿猴(Cercopithecus Aethiops)的肾脏切除组织切片。成纤维细胞线最初用于关注癌症的肉瘤病毒(RSV)的转化,但现在作为获得的免疫缺陷疾病(艾滋病)研究的宿主,以及与Simian病毒40的转染实验(SV40)和重组质粒载体。CV-1细胞表现出成纤维细胞形态,粘附到玻璃或塑料表面,并且对于逆转录酶是负的。已知细胞易于几种病毒,包括Poliovirus 1,单纯疱疹,Simian病毒40,加州脑炎和东方和西方大二脑炎。细胞表现出快速生长和染色体数偏移在高通道水平上发生。
有关CV-1细胞的最大转染效率,请参阅以下最佳转染条件。Genjet�试剂,1.0mL,足以在24个孔板中的300至600转染,或在6个孔板中的150至100转染。
最佳转染条件摘要: 转染当天的汇合 细胞培养条件 Genjet�(�L):DNA(�g)比例 DNA和转染试剂的稀释剂 孵育时间形成Genjet�/ DNA复合物 转染过程中血清/抗生素的存在 转染后5小时改变培养基 最大效率
转染结果: 报告基因 质粒 效率(GFP%) |
〜80% DMEM含有4.5克/升葡萄糖,10%FBS 3:1 无血清DMEM,具有4.5克/升葡萄糖 在室温下15分钟 是的 不 36小时
egfp. PEGFP-N3(CMV启动子) 75%
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储存情况
存储在4�c。如果正确储存,产品稳定为12个月或更长时间
显示在CV-1细胞上的Genjett�试剂的转染效率的图像。每个ATCC推荐培养基生长CV-1细胞,并通过Genjet1用PEGFP-N3转染。转染后24小时检查效率
数据表