优化PolyJet试剂的技术提示。

PolyJet DNA转染试剂高效转染上皮细胞和RAW 267.4细胞,无明显毒性。以下是最大化PolyJet转染试剂效率的一些技术要点。
1.DNA的数量和质量:DNA纯度对高效率至关重要。从大肠杆菌中提取的DNA。A260/280或更高时必须为1.80。对于6孔板,每孔约1.0�g的DNA通常就足够了。对于其他细胞培养形式,根据细胞培养皿的表面积调整DNA的量。
2.PolyJet/DNA比例:对于上皮细胞和RAW 267.4细胞,我们发现3:1的比例有很好的效果。
3.稀释剂:用于稀释DNA的稀释剂和PolyJet试剂必须是无血清的,如高糖无血清DMEM。Opti-MEM并不是一个好的选择,因为它可能会影响转染复合物的形成,所以不建议进行此步骤。
4.血清转染:我们进行了有无血清/抗生素的转染,没有发现转染效率的显著差异。因此,PolyJet试剂不受血清/抗生素的干扰。


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