选择稀释剂的稀释剂的技巧,Lipod293�和多射精DNA转染试剂。

选择稀释剂的稀释剂的技巧,Lipod293�和多射精DNA转染试剂。

为了有效地形成转染复合物,选择适当的稀释剂,用于稀释DNA转染试剂和DNA至关重要。除了温度,孵育时间外,稀释剂的性质对于完全形成转染复合物的性质非常重要,从而显着影响DNA转染效率。根据我们的验证数据,适当的稀释剂可能比“错误”稀释剂更有效地效率为50倍。更重要的是研究人员往往忽视稀释剂的重要性,并且未能识别稀释剂在转染复杂形成过程中的作用。

遵循以下技术提示,为Genjet�,Polyjet�和Lipod293中选择适当的稀释剂,DNA转染试剂:
1.为了完全形成转染复合物,稀释剂必须是无血清和蛋白质的。
2.尝试使用最接近细胞培养基组成的稀释剂。例如,如果您使用DMEM(补充有血清和抗生素)以生长HEK293细胞,最好的稀释剂是无血清和无抗生素的DMEM。如果您使用RPMI-1640培养基(补充有血清和抗生素)以生长HELA细胞,最好的稀释剂是血清/抗生素的RPMI-1640培养基。
3.切勿使用包含未知组件的介质。例如,切勿使用OPTI-MEMON稀释Genjet�,聚集蛋白和Lipod293�DNA转染试剂。根据我们的验证数据,用OPTI-MEMO稀释我们的转染试剂和DNA,至少处于HEK293,HELA,CHO和NIH 3T3细胞上处死的50%转染效率。Opti-Mem还可含有低水平的血清,这将大大损害转染效率。
4.基本上没有高葡萄糖的无血清DMEM是相当不错的选择。它非常容易进入并与其他细胞生长培养基相容。如果您在较低的转染效率下有困难,则可以考虑用高葡萄糖改变稀释剂到无血清DMEM。如果您不知道如何选择适当的稀释剂,您可以尝试使用高血糖的无血清DMEM,通常为您提供非常好的转染效率。


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