应用程序:
条带Western Blot用于再探测和质谱分析
特点:
-在5~15分钟内去除污渍
-在室温下孵化
-没有添加2-巯基乙醇或其类似物的恶臭气味
-适当配方，含环保、无害有机溶剂(有轻微气味)，完全分离结合抗体
应用一、Strip Western Blot重新检测
BlotFresh—Blot试剂与Pierce’s Restore—Blot萃取缓冲液的比较
-斑点剥离和重新pro同一张抗体床*：
NIH 3T3细胞中不同处理的总Akt(目录# A0501-1)
*使用ECL Plus开发2分钟�在柯达底片上曝光20秒
- BlotFre上海圣�撕裂试剂对抗原-抗体复合物的破坏效果比Pierce’s Restore�剥离缓冲液更有效:
BlotFresh�剥离试剂＊Pierce的Restore—剥落缓冲区＊
原始Expose x 1 'Expose x 5 '原始Expose x 1 'Expose x 5 '
*印迹最初用β-actin抗体检测，暴露10秒。然后分别用BlotFresh�Stripping Reagent和Pierce’s Restore�Stripping Buffer进行剥离5分钟和15分钟。洗涤后，用ECL Plus�显影2分钟，然后分别暴露于柯达BioMax薄膜1分钟和5分钟，以测试剥离效果
——BlotFresh�剥离试剂条a然后用不同的抗体重新检测:
一个。以总Akt抗体(编号:A0501-1)*进行Blot检测。
B．用BlotFresh�Stripping Reagent剥离印迹，再用phospho-Akt抗体重新探针(目录# A0503-1)*。
＊第1巷为通宵血清饥饿，第2~5巷用不同浓度的PDGF处理NIH3T3细胞。用ECL Plus显影2分钟�在柯达底片(ECL Plus)上曝光10秒是GE Healthcare-Amersham的商标)
应用二世。条带Western Blot质谱分析
质谱分离Western Blot检测方法:
-在RT上剥离印迹15分钟，去除一抗和二抗
-通过比较剥离的印迹和暴露的膜来定位蛋白质，并从印迹中剪切条带
-质谱法消化剪切带(见下图)
数据表
感言:
.．.已收到BlotFresh—Western Blot试剂样品。很棒的产品! !将相同的印迹2x剥离，得到的三张x光片与含有第二种抗体的初级印迹无区别。我今天会订一些……
------，凯瑟琳·贝尔博士，NCI, NIH
没有它我活不下去!这太神奇了。我曾经用过皮尔斯，我经常需要重新运行西部片，因为在脱衣后弄脏了污渍。自从我开始使用这个产品，我的生活已经改变了，它使我的研究更容易，我不需要重新运行凝胶，而且剥离过程只需要2分钟。这是一个非常棒的产品!
------作者Jennifer Lin博士，乔治华盛顿大学
一些产品引用:
1.Mahmoud M. El-Mas, Ming Fan，和Abdel A. Abdel- rahman。内毒素介导的心脏诱导一氧化氮合酶表达的诱导是乙醇对雌性大鼠降压作用的原因。j .杂志。其他实验。2008;324: 368 - 375
2.Grzegorz Woszczek, Li-Yuan Chen, Sahrudaya Nagineni, Sara Alsaaty, Anya Harry, Carolea Logun, Rafal Pawliczak和James H. Shelhamer。ifn - γ诱导半胱氨酸白三烯受体2的表达并增强人内皮细胞对半胱氨酸白三烯的反应性。免疫学杂志, 2007;178: 5262 - 5270
3.David A Baker, Aric Madayag, Lars V Kristianse, James H Meador-Woodruf, Vahram Haroutunia和Ilangovan Raju．胱氨酸-谷氨酸反向转运体对苯环利定仿精神病作用的贡献。神经精神药理学, 2007;8月29日在线发布
4.阿什利·b·威廉姆斯和帕特里夏·l·福斯特。大肠杆菌组蛋白样蛋白HU在固定相适应性突变中发挥作用。遗传学。2007;735年177:723�
