LipoD293�体外DNA转染试剂

描述
利用我们的创新和专有的脂质结合技术,LipoD293�(版本。II)是专门设计和制定通过添加专有的增强剂,使转染HEK293细胞和其他哺乳动物细胞(图1)。作为一个基于第二代脂质体DNA转染试剂,LipoD293�(版本。II)提供了非常高的转染效率相关的HEK293细胞以及许多哺乳动物细胞细胞毒性较小。LipoD293�试剂(版本。II),从其先前版本升级精制化学、高效的基因传递的3 ~ 4倍。LipoD293�试剂(版本。II), 1.0毫升,足以让在24孔板或333 ~ ~ 666转染转染在6孔板。


图1所示。一个卡通展示LipoD293�(版本。(二)提高基因传递

特性
——首选hard-to-transfect细胞
——特殊高滴度的病毒生产
——同样好很久dna (180 kb)
同样适合悬挂293个细胞(例如,293 f、293 h等)
——高水平的重组蛋白的生产
——存在血清和抗生素提高效率在293个细胞
——特殊为单一DNA转染效率和多DNA co-transfection
——非常负担得起的

储存条件
存储在4�C。如果保存得当,产品稳定的12个月或更长时间。

比较转染效率LipoD293�DNA体外转染试剂(版本。(二)品牌产品

比较转染效率LipoD293�试剂(版本。II)和2000 (L2K)和Fugene lipofectamine高清对HepG2细胞。
右面板:比较转染效率LipoD293(版本。与Lipofecatmine II) 2000 (L2K), Fugene高清对HepG2细胞。DNA (pEGFP-N3)转染GFP转染试剂不同每个制造商的协议HepG2细胞胶原蛋白预处理菜(培养)。GFP阳性细胞(%)和荧光强度被通过流式细胞仪检测转染后48小时
左面板:血清和抗生素的存在增强了LipoD293(版本。(二)效率对HepG2细胞。HepG2细胞(生长在胶原蛋白治疗碗)转染有三个不同的条件- - - - - -免费血清和抗生素,10%血清和抗生素去除5小时后转染和10%的血清和抗生素没有删除5小时后转染。


比较转染效率LipoD293�试剂(版本。II)和lipofectamine 2000 (L2K),交通和Fugene 6 CHO细胞。
右面板:比较转染效率LipoD293(版本。(二)Lipofecatmine 2000 (L2K),交通和Fugene 6 CHO细胞。DNA编码Renilla荧光素酶(phRL-CMV)和GFP (pEGFP-N3)转染不同DNA转染试剂/制造商的协议。与Renilla Renilla荧光素酶活性和GFP荧光检测分析系统和尼康Eclipse荧光显微镜分别转染后24小时。
左面板:比较价格(美元/ 1.0毫升瓶)LipoD293和Lipofecatmine 2000 (L2K),交通和Fugene 6。收集所有的价格从制造商的网站。


比较转染效率LipoD293�试剂lipofectamine 2000 (L2K) hard-to-transfect细胞,主要鼠主动脉平滑肌细胞。大鼠主动脉平滑肌细胞被准备和转染pEGFP-N3 LipoD293�试剂(左面板)和Lipofecatmine 2000(分别L2K,右面板)/制造商的协议。转染效率是评价通过检测GFP荧光显微镜尼康Eclipse 2000转染后24小时。上面的照片请提供的博士Nickolai Dulin部分肺和急救护理,芝加哥大学。


比较转染效率LipoD293�试剂与Fugene高清hard-to-transfect细胞,LNCap细胞。LNCap细胞生长,写明ATCC推荐程序和co-transfected pBabe-hygro-SSeCKs (1.5 ug), pEGFP-N3 (0.5 ug)每口井的板(6)LipoD293�试剂(左面板)和Fugene高清面板(右)分别以制造商的协议。转染效率是评价通过检测GFP荧光显微镜尼康Eclipse 2000转染后24小时。上面的照片请提供的林恩高的罗斯威尔帕克癌症研究所博士。


上两个例子显示异常LipoD293效率�试剂hard-to-transfect细胞HepG2和SaoS-2细胞。HepG2和95% confluency SaoS-2细胞转染pEGFP-N3和埃因霍温- ?牛乳糖dna分别在血清和抗生素的存在。效率是由蔡司510年48小时后检查转染共焦显微镜和?牛乳糖分别染色设备。



比较转染效率LipoD293�试剂与293 fectin HEK293细胞。与pEGFP-C1 HEK293细胞转染质粒用LipoD293�体外DNA转染试剂(版本。II)最受欢迎的品牌产品(上半部分)和293年fectin�的表达载体(下图)。细胞是由尼康Eclipse可视化荧光显微镜与DIC相位成像(左面板)和FITC成像post-transfection 24小时(右面板)。


比较LipoD293�试剂与293 fectin Xfect Fugene 6转染试剂与悬架293 f细胞蛋白的生产。30毫升的293 f细胞培养在标准培养基与pEGFP-6xHis转染质粒用LipoD293�体外DNA转染试剂(版本。(二)(20 ug质粒DNA), 293 fectin (30 ug质粒DNA), Xfect (30 ug质粒DNA)和Fugene 6 (30 ug质粒DNA) /制造商的标准转染协议。GFP荧光可视化48小时后转染LipoD293(左面板),Xfect 293 fectin B, C和D Fugene 6。6 xhis GFP标记的蛋白质纯化vi一个Ni-NTAaffinity列。1日5 ul洗脱部分解决在sds - page接着考马斯亮蓝染色(右面板上部E)对LipoD293巷1,巷2蛋白质标记,为Xfect巷3巷4 293 fectin巷5 Fugene 6。低蛋白质产量量化通过光谱仪(右面板F)。



比较LipoD293�(版本。II)和Lipofecatmine第第在一代的慢病毒(LV)。三个互补与LipoD293 co-transfected�(版本。II)和Lipofectamine肝细胞(肝)293英尺。pHR-SIN-cppt-CMVEWP GFP向量,是用来确定LV的效价。1 x105 293 f细胞每口井是用一个24孔板镀其次是增加不同数量的向量上层清液,1微升(上半部分)和10毫升(下图)。5天后,细胞通过流式细胞仪。在右上角的数字表明转导细胞的百分比。LV生成的浓度与LipoD293�和L2K量化8 x10 ^ 6和3 x10 ^ 6分别涂/毫升

技术信息和数据表
- - - - - -LipoD293�(版本。(二)试剂通用协议和数据表
- - - - - -LipoD293�(版本。(二)试剂短期协议
- - - - - -LipoD293�(版本。(二)试剂协议使转染悬挂293和CHO细胞
- - - - - -LipoD293�(版本。(二)对慢病毒生产试剂
- - - - - -LipoD293�(版本。(二)试剂rAAV生产
- - - - - -Technical Note &转染技巧


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奖状
我非常高兴与LipoD293转染试剂!我比较LipoD293 Lipofectamine转染质粒产生的病毒pseudoparticles哇!我恢复了4倍病毒使用比Lipofectamine LipoD293试剂! !这是我和我的导师的好消息,因为它意味着我不必花那么多的时间(和资源)使转染293 t细胞恢复病毒体外实验。我的导师也很高兴LipoD293成本远低于Lipofectamine ! !我们已经订购了5毫升LipoD293中,我已经说服我的实验室伴侣转向LipoD293以来我有这样好的结果。感谢这样一个伟大的产品!
- - - - - - - - - -克里斯蒂Lavine博士,哈佛大学

我想更新你的LipoD293免费样品寄给我们。我最近转染一些Plat-E并排Lipofectamine 2000和你的产品! ! !我们也验证海拉细胞,否则我们很满意我们看到迄今为止!谢谢你给我们发送免费样品,我们绝对做销售!
- - - - - - - - - -凯瑟琳•盖洛博士,辛辛那提大学

我们已经尝试了LipoD293 DNA体外细胞转染试剂在293英尺。在第一个瓶我们使用的协议表达载体提供theVirapower盒子里插入(Virapower pBABE-GFP质粒,加上Lipofectamine)。在第二瓶我们使用LipoD293 (ul / 6毫升媒体30日)具有相同数量的Virapower和质粒作为第一个瓶。结果是惊人的:LipoD293给两倍的转化株Lipofectamine 2000…
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