描述
DNA GenJet�在体外预优化U2OS细胞转染试剂，用于转染U2OS细胞．U2OS细胞系最初被称为2T细胞系，是从一名患骨肉瘤的15岁女性的骨组织中培养出来的。建立于1964年，原始细胞取自胫骨中分化肉瘤。U2 OS细胞呈上皮贴壁形态，在与WI-38细胞共培养或对抗SV40、RSV或腺病毒的CF试验中未检测到病毒。细胞对胰岛素样生长因子I (IGF-I)和胰岛素样生长因子II (IGF- II)受体呈阳性，并表达多种抗原，包括a型血、Rh+、HLA A2、Aw30、B12、Bw35和B40(+/-)。
为使U2 OS细胞转染效率最大化，参照以下最佳转染条件。GenJet试剂，1.0 ml, 24孔板300 ~ 600转染，6孔板150 ~ 300转染。
最佳转染条件总结:
在转染当天进行融合
细胞培养条件
GenJet: DNA(�g)比例
DNA稀释剂和转染试剂
形成GenJet复合物的孵化时间
转染过程中血清/抗生素的存在
转染5小时后更换培养基
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
60 ~ 70%
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
3:1
无血清DMEM，含4.5 g/L葡萄糖
15分钟RT
是的
没有
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
95％
|
储存条件
4欧元。如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间
图显示转染效率的GenJet试剂在U2 OS细胞
试剂对U2OS进行了优化．U2OS细胞在ATCC推荐的培养基上生长，用GenJet�转染pEGFP-N3。转染后48小时检测效率
数据表
