描述
DNA GenJet�在体外mef的转染试剂是预先优化和条件的传输nsfecting小鼠胚胎成纤维细胞s (mef)．mef需要支持未分化的小鼠或人类ES细胞，iPS细胞的生长，因此它们也被称为喂养细胞。mef是从小鼠胚胎中分离出来的，并在其早期传代中使用。在mef用作馈线单元之前，它们必须通过辐照或丝裂霉素C来阻止细胞进一步分裂。然而，mef是出了名的难以转染。使用预先优化的试剂，您将获得高达85%的GFP+ mef。
T优化了“剃毛细胞转染”方案，以达到最大的转染效率。以下为MEFs细胞转染效率最高的最佳转染条件。GenJet试剂，1.0 ml, 24孔板500次转染或6孔板250次转染。
最佳剃毛细胞转染条件综述:
细胞培养基
细胞在剃须当天的一致性
电镀用电池密度
GenJet: DNA(�g)比例
DNA稀释剂和转染试剂
形成GenJet复合物的孵化时间
转染复合物的细胞培养时间
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
DMEM加4.5 g/L葡萄糖，10%胎牛血清
95 ~ 100%
1.3x10^5单元每平方centimeter
4:1
无血清DMEM，含4.5 g/L葡萄糖
12分钟RT
37度20分钟
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
８５％
|
储存条件
4欧元。如果储存得当，产品可以稳定12个月或更长时间
图显示GenJet试剂转染mef的效率．在ATCC推荐的培养基上培养mef，用GenJet�转染pEGFP-N3。转染后24小时检测效率
数据表
