上皮细胞转染。

从皮肤到组织内的腺状结构，上皮细胞遍布全身。在体内，这些细胞附着在三维基底膜基质上。正常的上皮细胞是非常困难的转染-特别是当使用脂质体为基础的转染试剂。之前我们只使用电穿孔(Amaxa)转染正常人类结肠上皮细胞，得到了65%的GFP+细胞。多亏了SignaGe188金宝慱亚洲体育APP下载n，我们现在已经成功转染正常人类结肠上皮细胞使用GenJet Ver。II (Cat # SL100489)具有高达75%的GFP+效率。下面是用GenJet Ver转染上皮细胞的简要方案。II(猫# SL100489):
1.转染时上皮细胞增殖率约为85%。上皮细胞必须是新鲜制备且健康的。
2.对于6孔板，稀释1.0�g DNA和3.0�l GenJet Ver。每孔II无血清DMEM。将稀释后的试剂加入稀释后的DNA中，室温下15分钟形成转染复合物。
3.将转染复合物直接加入上皮细胞。在6孔板中，在有血清/抗生素的情况下进行转染，转染量为每孔1.0 ml。
4.转染5小时后取下转染复合物，并换回正常生长培养基。
5.转染后24~48小时检查转基因表达情况。