描述
DNA GenJet�在体外转染试剂为反式L929细胞预先优化谈吐L929细胞。L929是小鼠非整倍体fibrosarcoma细胞系,常被用来检测tnf和TNF-beta。治疗肿瘤坏死因子启动细胞凋亡和随后的细胞死亡。�的检测水平的50个pg / mL。另一个细胞系大约5-10-fold wehi - 164更敏感。一些L929积累已经开发,允许检测肿瘤坏死因子的浓度大约30 pmol / L(大约500 /毫升)。苏俄式薄煎饼,抗TNF也已建立。
请参考以下优化转染条件最大L929细胞转染效率。GenJet�试剂,1.0毫升,足以让300 - 600转染24孔板或在6孔板150 - 300转染。
总结优化转染条件:
融合在转染
细胞培养条件
GenJet��l: DNA (�g)比例
DNA和转染试剂的稀释剂
培养时间形成GenJet�/ DNA复杂
在转染存在血清/抗生素
转染后改变介质
最大效率
转染结果:
报告基因
质粒
效率(GFP %) |
~ 80%
DMEM和4.5 g / L葡萄糖,10%的边后卫
3:1
无血清DMEM和4.5 g / L葡萄糖
在RT 15分钟
是的
是的,转染后~ 5小时
48小时
EGFP
pEGFP-N3 (CMV启动子)
65%
|
储存条件
存储在4�C。如果保存得当,产品稳定的12个月或更长时间
数据表
