LIPOD293。体外DNA转染试剂

描述
通过利用我们的创新和专有的脂质结合技术，Lipod293。（VER。II）是通过添加专有增强剂来转染HEK293细胞和其他哺乳动物细胞的专门设计和配制的（图1）。作为第二代基于脂质体的DNA转染试剂，LiPOD293。（VER。II）为HEK293相关细胞以及许多细胞毒性较低的哺乳动物细胞提供了极高的转染效率。Lipod293。试剂（VER。II），从其先前版本的精制化学升级中升级，基因递送的效率高3〜4倍。LIPOD293。试剂（VER。II），1.0 mL，足以在24个井板中进行约666次转染，或在6个井板中转染〜333个转染。


图1。显示Lipod293的动画片（VER。II）增强的基因递送

特征
- 难以转化的单元格的最佳选择
- 病毒生产的高滴度
- 同样有益于很长的DNA（最多180 kb）
- 同样适用于悬架293个单元格（例如293F，293H等）
- 高水平的重组蛋白产生
- 血清和抗生素的存在提高了293个细胞的效率
- 单DNA转染和多DNA共转染的特殊效率
- 非常负担得起

储存情况
存储在4 c。如果正确存储，则该产品稳定12个月或更长时间。

LIPOD293的转染效率的比较在体外转染试剂（VER。II）与品牌产品的比较

LIPOD293试剂（VER。II）与Lipofectamine 2000（L2K）和HEPG2细胞上Fugene HD的转染效率的比较。
右图：LiPOD293（VER。II）与Lipofecatmine 2000（L2K）的转染效率和HEPG2细胞上的Fugene HD的比较。GFP DNA（PEGFP-N3）用每个制造商的方案转染了HEPG2细胞（在胶原蛋白预处理的菜肴上培养），转染不同的转染试剂。通过转染后48小时通过FACS检测GFP阳性细胞（％）和荧光强度
左图：血清和抗生素的存在增强了LIPOD293（VER。II）对HEPG2细胞的效率。HEPG2细胞（在经过胶原蛋白治疗的菜肴上生长）用三种不同的疾病转染-------无血清和抗生素，存在10％血清和抗生素，然后在转染后去除5小时，并存在10％血清和抗生素，没有转染后5小时清除。


LIPOD293试剂的转染效率（VER。II）与Lipofectamine 2000（L2K），Transit和Fugene 6上的转染效率的比较。
右面板：LiPOD293（VER。II）与Lipofecatmine 2000（L2K），Transit和Fugene 6的转染效率的比较。根据制造商的方案，用不同的DNA转染试剂转染编码Renilla荧光素酶（PHRL-CMV）和GFP（PEGFP-N3）的DNA。转染后24小时24小时，用Renilla分析系统和尼康Eclipse荧光微拷贝检测到Renilla荧光素酶活性和GFP荧光。
左面板：比较LipoD293的价格（$/1.0毫升小瓶）与Lipofecatmine 2000（L2K），Transit和Fugene 6的比较。所有价格均从制造商的网站收集。


LiPOD293试剂与Lipofectamine 2000（L2K）的转染效率的比较，在难以转化的细胞，主要大鼠主动脉平滑肌细胞上。根据制造商的规程，分别由LipoD293 resgent（左图）和Lipofecatmine 2000（L2K，右图）用PEGFP-N3制备大鼠主动脉平滑肌细胞。转染后24小时通过尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光来评估转染效率。以上图片由芝加哥大学肺和重症监护区的Nickolai Dulin博士提供。


LIPOD293试剂与Fugene HD的转染效率的比较，在难以转化的细胞LNCAP细胞上。将LNCAP细胞作为ATCC推荐的程序生长，并与PBABE-HYGRO塞克（1.5ug）和PEGFP-N3（0.5 ug）每孔（6井板）Lipod293.试剂（左图）和Fugene HD（右图）和Fugene HD（右）面板）分别根据制造商的协议。转染后24小时通过尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光来评估转染效率。上面的图片由罗斯威尔公园癌症研究所的Lyn Gao博士提供。


两个例子显示了LIPOD293的特殊效率。在存在血清/抗生素的情况下，分别用PEGFP-N3和PSV - ？？ - 半乳糖苷酶DNAS转染95％汇合的HEPG2和SAOS-2细胞。Zeiss 510共聚焦显微镜和？ - 半乳糖苷酶染色试剂盒转染后48小时检查效率。



HEK293细胞上LIPOD293试剂与293fectin的转染效率的比较。HEK293细胞使用LIPOD293。在体外DNA转染试剂（VER。II）（上图）和最流行的Invitrogen（下面板）最受欢迎的品牌产品293fectin。通过DIC相成像（左图）和FITC成像（右图）24小时转染后24小时，通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞。


LIPOD293。试剂与293fectin，Xfect和Fugene 6转染试剂的比较，悬浮液293F细胞。30毫升使用LIPOD293。在标准培养基中培养的293F细胞用PEGFP-6XHIS质粒转染了体外DNA转染试剂（VER。II）（20 ug质粒DNA），293fectin（30 ug质粒DNA），Xfect（30 UG质粒DNA）（30 UG质粒DNA）（30 UG质粒DNA）根据制造商的标准转染方案，Fugene 6（30 ug质粒DNA）。转染后48小时可视化GFP荧光（左图），a lipod293，b，用于293fectin，c for xfect和f for fugene 6. 6 xhis标记的GFP蛋白，然后纯化VI。ni-ntaaffinitY列。在SDS-PAGE上解析5 ul的第一个洗脱部分，然后在coomassie亮蓝色染色（右上图E）上进行coomassie亮蓝色（右上图E），泳道1用于Lipod293，plotein Marker的泳道2，Xfect 3泳道，Xfect 4，泳道4，用于293fectin和5Fugene 6.通过光谱仪（右下图F）定量蛋白质产率。



Lipod293。（Ver。II）和Lipofecatmine LTX（LTX）的比较与慢病毒（LV）的生成。三个cDNA与Lipod293。（Ver。II）和Lipofectamine LTX（LTX）共转染到293ft细胞中。GFP载体PHR-SIN-CPPT-CMVEWP用于确定LV的滴度。将每个孔的1x105 293F细胞铺在24井板上，然后分别添加不同量的载体上清液，1个微晶（上图）和10个微层（下图）。5天后，细胞与FACS通过。右上角的数字表示转导细胞的百分比。用LiPOD293。和L2K生成的LV的滴度分别量化为8x10^6和3x10^6 tu/ml

技术信息和数据表
-Lipod293。（VER。II）试剂一般协议和数据表
-Lipod293。（VER。II）试剂短协议
-Lipod293。（VER。II）转染悬架293和CHO细胞的试剂协议
-Lipod293。（Ver。II）慢病毒的试剂
-Lipod293。（VER。II）RAAV生产的试剂
-技术说明和转染技巧


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推荐
Lipod293转染试剂感到非常兴奋！我将LipoD293与脂肪系胺进行了比较，以转染质粒，以产生病毒式颗粒和哇！我使用LipoD293试剂比Lipofectamine恢复了4倍的病毒！！这对我和我的导师来说是个好消息，因为这意味着我不必花太多时间（和资源）用于转染293T细胞来恢复体外实验的病毒。我的导师也很高兴Lipod293的成本比Lipofectamine低得多！我们已经订购了5毫升的lipod293，现在我说服了我的实验室伴侣切换到Lipod293，因为我对此取得了如此出色的效果。感谢您制作如此出色的产品！
--------哈佛大学克里斯蒂·拉文（Christy Lavine）博士

我想在您发送给我们的LipoD293的免费样品中向您更新。我最近与Lipofectamine 2000并排转染了一些Plat-E的并排，您的产品超越了它！！！我们还使用HeLa细胞来验证它，但否则我们对迄今为止所看到的东西感到非常满意！感谢您向我们发送免费样本，它一定会为我们销售！
--------辛辛那提大学凯瑟琳·加洛（Catherine Gallo）博士

现在，我们已经在293FT细胞上尝试了LIPOD293 DNA的体外转染试剂。在第一个烧瓶中，我们使用了Virapower盒插入物中提供的Invitrogen（Virapower，Pbabe-GFP质粒，以及Lipofectamine）的方案。在第二瓶中，我们使用了Lipod293（30 UL/6ML介质），其含量与第一个烧瓶相同。结果令人惊叹：lipod293的转化剂是Lipofectamine 2000的两倍...
--------韦恩州立大学的Beta测试师