描述
基于我们的专有聚合物合成技术,PolyJet dNA体外转染试剂被配制为可生物降解的聚合物基于DNA转染试剂,可确保对HEK293的有效和可重复转染,COS-7,NIH-3T3,HELA,CHO和宽阔的哺乳动物CELLS。PolyJet�试剂能够以非常低的浓度在电泳过程中固定DNA迁移,并在RT的5分钟内形成转染复合物。该试剂的一个显着特征是转染复合物内吞作用后聚合物的快速和完全降解(图1),导致细胞毒性少得多。Polyjet r试剂(1.0 mL)足以在24个井板中进行〜667次转染或6个井板中的〜333转染,为领先产品提供了一种非常实惠的替代品,用于转染各种常用和难以转移的哺乳动物细胞。
图1。一部动画片,显示了聚会的生物降解�转染复合物内吞作用后DNA转染试剂
特征
- 内吞作用后的生物降解
- 病毒生产的高滴度
- 同样有益于很长的DNA(> 89 kb)
- 同样适用于单DNA转染和多DNA共转染
- 高水平的重组蛋白产生
- 简单而强大的转染程序
- 非常负担得起
储存情况
存储在4 c。如果正确存储,则该产品稳定12个月或更长时间。
哺乳动物细胞类型的广泛转染光谱
细胞系 |
效率(%GFP) |
细胞系 |
效率(%GFP) |
McArdle 7777 hep3 谢普 3T3-442A cos-7 CV-1 D 407 DHD Pro.B 3ll B16-F10 Baec BHK-21 CA滑雪 caco2 乔 HCS-2/8 HEK-293 Hela HLMEC H-MVEC Huh-7d12 ATT20 SK-N-SH C2C12 hepg2 |
65-70% 67-76% 68-71% 35% 85-90% 60% 70% 70% 80% 85% 51% 80% 88% 60% 88% 61% 86% 88% 72% 59% 72% 46% 29% 46% 72% |
hESC SN56 MC3T3-E1 原发性黑素细胞 mescs L929 MCF-7 MDCK Neuro2a NIH 3T3 PC12 SH-SY5Y Siha SKOV3 嗯7 IGROV1 DF-1,cHiCken eMbryonicCEll 6csfmeo Wehi 231 A549 lncap Prim。小鼠角质形成细胞 Prim。人皮肤成纤维细胞 Prim。人类前脂肪细胞 Prim。mOusee姆布里。Fibroblast |
70% 81% 80% 35% 70% 59% 68% 68% 86% 76% 50% 25% 60% 65% 70% 35% 50% 71% 26% 75% 75 29% 50% 32% 30% |
示例显示了在常用细胞上polyjet dNA在体外转染试剂中的转染效率
在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上PolyJet与Lipofectamine Plus的转染效率比较。分别用PolyJet(左图)和Lipofectamine Plus(右图)将HA标记的β-微管蛋白cDNA分别输送到CHO细胞中。针对HA TAG的FITC共轭抗体用于拾取HA-BETA-微管蛋白(绿色),而DM1A抗体用于检测内源性α-微管蛋白,然后用若丹明共轭二抗抗体(红色)探测。上图是由德克萨斯大学休斯顿医学院大学的Shang Yin博士提供的
一个比较,显示了PolyJet试剂与主要产物Lipofectamine 2000在HEK293FT细胞上的转染效率。HEK-293FT细胞分别用PolyJet(左图)和Lipofectamine 2000(右图)转染GFP载体(PEGFP-N3)。转染后24小时,通过尼康日食荧光显微镜可视化细胞
一个比较,显示了PolyJet试剂与主要产物Lipofectamine 2000在HEPG2细胞上的转染效率。HEPG2细胞分别用PolyJet(左图)和Lipofectamine 2000(右图)转染GFP载体(PEGFP-N3)。转染后24小时,通过尼康日食荧光显微镜可视化细胞
在MDCK细胞上PolyJet。与Fugene HD的转染效率比较。用polyJet将普通的GFP DNA转导到MDCK细胞中�(左图)和Fugene HD(右图)试剂分别根据制造商的协议。转染后48小时,在荧光显微镜下可视化GFP和DAPI染色。上面的比较数据和图片由纽约大学医学中心的Ge Zhou博士完成并提供
一个比较,显示了PolyJET试剂与主要产物Lipofectamine 2000在MDCK细胞上的转染效率。MDCK细胞很难转染。使用专有的“剃须细胞转染”方案,PolyJet。MDCK细胞分别用PolyJet(左图)和Lipofectamine 2000(右图)转染GFP载体(PEGFP-N3)。转染后36小时,通过尼康日食荧光显微镜可视化细胞
一个比较,显示了PolyJET试剂与领先产品Fugene HD在LNCAP细胞上的转染效率。LNCAP细胞分别用PolyJet(左图)和Fugene HD(右图)转染GFP载体(PEGFP-N3)。转染后24小时,通过尼康日食荧光显微镜可视化细胞
显示polyjet的特殊转染效率的图像绅士人类胚胎干细胞(hESCS)。这hESC在geltrex上的E8培养基中生长VS(左图,DIC成像)用PEF1转染α-GFP。转染后24小时,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察GFP表达(右图)。以上图片由博士Marina Pryzhkova约翰·霍普金斯大学(Johns Hopkins University)的礼貌
使用polyjet用PEGFP-C1质粒转染的Neuro2a细胞。体外DNA转染试剂。通过DIC相成像(左)和FITC成像(右)24小时转染,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察Neuro2a细胞可视化
比较聚细胞毒性喷射�在原代鼠皮肤成纤维细胞上用L2K�进行体外转染试剂。将原发性鼠成纤维细胞与上面的指定转染试剂/PEGFP-C1(DNA)复合物在无血清DMEM高葡萄糖培养基中进行4小时孵育4小时,然后再替换全含血清的培养基。通过转染后24小时,通过尼康日食荧光显微镜观察细胞
dATA表和协议
-转染哺乳动物细胞的一般方案
-转染哺乳动物细胞的简短方案
-用于转染难以转化的哺乳动物细胞的高级方案
-转染悬架293和CHO单元的协议
-慢病毒生产方案
-RAAV生产方案
-技术说明和转染技巧
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推荐:
s奥里(Orry)非常延迟,但现在我完全爱上了polyjet。我在鼠标ESC上使用了一段时间,效率相对较高,为50〜70%。
---------Marina Pryzhkkova博士,JHU
聚jet转染试剂和Lipofectamine 2000的工作均匀,很少有293,PC-3和22RV1细胞的细胞死亡证据。我将挑衅地考虑切换。
-----蒂法尼·华莱士(Tiffany Wallace)博士,NCI / NIH
我只与测试样品(PolyJet)和LiPO2000并排进行了cos-7细胞的GFP转染。结果非常好。Polyjet甚至比L2K更好。
------ Feng Qiao博士,Nei / NIH
这个周末,我在NIH-3T3鼠标成纤维细胞上测试了PolyJet样品。结果比Lipofecatmine LTX好得多。我正在附上一个PowerPoint幻灯片的结果(我没有量化转染效率的%,但图片可以指出)。我发现难以传递的细胞系的协议比标准协议更好。
-----斯蒂芬妮·墨菲(Stephanie Murphy)博士,达特茅斯学院
我有机会最终尝试您的产品。这是巨大的成功。我使用了HeLa细胞,并获得了10%的转染效率(Lipofectamine <0.1%)。谢谢!我想知道我是否也尝试了GenJet -plus DNA在体外转染试剂中?根据您的网站,该试剂比常规PolyJet更好。
------- Yumi Uetake博士,UMass
我测试了PolyJet,在MDCK上看起来很棒。我们下令。谢谢!
-------纽约大学Ge Zhou博士
我们很乐意提供反馈。PolyJet在HEPG2细胞中对我们的表现非常好,我们通过遵循您建议的方案中的条件,在PMAX GFP质粒中获得了约80%的效率。我们与Lipofectamine进行了比较,该比较仅显示约20-30%的转染效率。我们正在计划实验,并将尽快订购。
-------艾米丽·麦卡利斯特(Emily McAllister),PBRC