描述
PolyJet - DNA体外转染试剂PolyJet - DNA体外转染试剂PolyJet - DNA体外转染试剂PolyJet - DNA体外转染试剂PolyJet - DNA体外转染试剂聚合物基于DNA转染试剂,确保在HEK293上进行有效且可重复的转染,COS-7, NIH-3T3, HeLa, CHO和各种难以转染的哺乳动物cel是PolyJet吗� 试剂能够在极低浓度的电泳过程中固定DNA迁移,并在RT时在5分钟内形成转染复合物。试剂的一个显著特点是,在转染复合物内吞作用后,聚合物迅速完全降解(图1),导致细胞毒性大大降低。PolyJet� 试剂1.0 ml足以在24孔板中进行约667次转染或在6孔板中进行约333次转染,为转染多种常用且难以转染的哺乳动物细胞提供了一种价格合理的替代品。
图1. 展示PolyJet生物降解的卡通画�转染复合物内吞后的DNA转染试剂
特征
-细胞内吞后可生物降解
-异常高滴度的病毒生产
-同样适用于非常长的DNA(>89KB)
-同样适用于单DNA转染和多DNA共转染
-高水平的重组蛋白生产
-简单和强大的转染程序
-非常实惠
储存条件
4号店�C.如果妥善储存,产品可稳定12个月或更长时间。
哺乳动物细胞类型的广谱转染
细胞系 |
效率(% GFP) |
细胞系 |
效率(% GFP) |
麦卡德尔7777 Hep3D 谢普 3T3-442A COS-7 CV-1 D 407 DHD Pro.b 3LL B16-F10 BAEC BHK-21 人宫颈癌细胞 CaCo2 赵 HCS-2/8 HEK-293 希拉 HLMEC H-MVEC Huh-7D12 ATT20 SK-N-SH C2C12 HepG2 |
65-70% 67-76% 68-71% 35% 85-90% 60% 70% 70% 80% 85% 51% 80% 88% 60% 88% 61% 86% 88% 72% 59% 72% 46% 29% 46% 72% |
人胚胎干细胞 SN56 MC3T3-E1 原代黑素细胞 小鼠胚胎干细胞 L929 MCF-7 MDCK 神经2A NIH 3T3 PC12 SH-SY5Y SiHa 斯科夫3 哈-7 IGROV1 DF-1,Ch伊肯E胚胎的C厄尔 6 csfmeo WEHI 231 A549 LNCap Prim.鼠标角化细胞 人皮肤成纤维细胞 原始人前脂肪细胞 一本正经的米入海e毛茸茸的。f易卜拉斯特 |
70% 81% 80% 35% 70% 59% 68% 68% 86% 76% 50% 25% 60% 65% 70% 35% 50% 71% 26% 75% 75 29% 50% 32% 30% |
PolyJet - DNA体外转染试剂在常用细胞上的转染效率示例
PolyJet与lipofectamine Plus转染中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的效率比较。分别用PolyJet�(左图)和lipofectamine Plus(右图)将HA标记的β -微管蛋白cDNA转染CHO细胞。用FITC标记的抗HA标签抗体提取HA-beta微管蛋白(绿色),用DM1a抗体检测内源性α微管蛋白,然后用罗丹明标记的二抗检测(红色)。上图由美国德克萨斯大学休斯顿医学院尚殷博士提供
对比PolyJet试剂与领先产品Lipofectamine 2000在HEK293FT细胞上的转染效率。通过PolyJet将GFP载体(pEGFP-N3)转染HEK-293FT细胞� (左图)和Lipofectamine 2000(右图)。转染后24小时,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞
PolyJet转染效率的比较� 试剂与领先产品Lipofectamine 2000对HepG2细胞的作用。通过PolyJet将GFP载体(pEGFP-N3)转染HepG2细胞� (左面板)和Lipofectamine 2000(右面板)。转染24小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察细胞
PolyJet与Fugene HD转染MDCK细胞的效率比较。用PolyJet将纯GFP DNA导入MDCK细胞�(左图)和Fugene HD(右图)试剂根据制造商的协议。转染48小时后在荧光显微镜下观察GFP和DAPI染色。以上对比数据及图片由纽约大学医学中心周舸博士礼貌完成并提供
PolyJet转染效率的比较� 试剂与领先产品Lipofectamine 2000在MDCK细胞上的对比。众所周知,MDCK细胞很难转染。PolyJet�(左图)与Lipofectamine 2000(右图)在专利的“剃光细胞转染”协议下,GFP阳性细胞高达70%,而Lipofectamine 2000(右图)约为5%。用PolyJet�(左图)和Lipofectamine 2000(右图)分别转染GFP载体(pEGFP-N3)。转染36小时后尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞形态
PolyJet转染效率的比较� 试剂与领先产品Fugene HD在LNCap细胞上的对比。用PolyJet�(左图)和Fugene HD(右图)分别转染GFP载体(pEGFP-N3)。转染24小时后尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞形态
PolyJet的转染效率非常高金顿人胚胎干细胞(HESC)。的hESCs在Geltrex上的E8培养基上生长vs(左图,DIC显像)转染pEF1αgfp。转染24小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察GFP表达(右图)。以上图片由博士玛丽娜Pryzhkova约翰·霍普金斯大学的礼节
PolyJet转染pEGFP-C1质粒的Neuro2A细胞�体外DNA转染试剂。转染24小时后,用尼康Eclipse荧光显微镜观察神经2a细胞的DIC相位成像(左)和FITC成像(右)
聚乳酸的细胞毒性比较飞机� 含L2K的DNA体外转染试剂� 在原代小鼠皮肤成纤维细胞上。将原代小鼠成纤维细胞与上述指定的转染试剂/pEGFP-C1(DNA)复合物在无血清DMEM高糖培养基中孵育4小时,然后替换含完整血清的培养基。转染24小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜和DIC相位成像观察细胞
Data表和协议
-转染哺乳动物细胞的通用协议
-哺乳动物细胞转染的简短方案
-用于转染难转染哺乳动物细胞的高级方案
-转染悬浮293和CHO细胞的方案
-慢病毒生产协议
-rAAV生产协议
-技术说明和转染提示
好消息!我们是offering“无线PowerPoint演示者“适用于购买5x1.0 ml PolyJet的客户� 到2010年3月或更多。好好利用它,不要错过这个机会。。。
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感言:
年代很抱歉耽搁了这么久,但现在我完全爱上了PolyJet。我已经在小鼠胚胎干细胞上使用了PolyJet一段时间,效率相对较好50~70%。
--------Marina Pryzhkova,博士,JHU
PulJET转染试剂和脂质体2000同样有效,在293、PC-3和22Rv1细胞上几乎没有细胞死亡的证据。
-----Tiffany Wallace博士,NCI/NIH
我只在COS-7细胞上同时使用了测试样本(PolyJet)和带有GFP转染的Lipo2000。结果非常好。PolyJet甚至比L2K更好。
------乔峰博士,美国国立卫生研究院/内华达州
我这周末在NIH-3T3小鼠成纤维细胞上测试了PolyJet的样本。结果明显优于Lipofecatmine LTX。我附上了我的研究结果的幻灯片(我没有量化%转染效率,但图片说明了要点)。我发现对难转染细胞株的治疗方案比标准方案更有效。
-----斯蒂芬妮·墨菲,达特茅斯学院博士
我终于有机会试用你们的产品了。它取得了巨大的成功。我使用了HeLa细胞,获得了10%的转染效率(Lipofectamine <0.1%)。谢谢你!我想知道我是否也尝试GenJet - Plus DNA体外转染试剂?根据你们的网站,这种试剂比普通的PolyJet效果更好。
-------尤米·尤塔克,麻省大学哲学博士
我测试了PolyJet,它在MDCK上看起来很棒。我们下了订单。谢谢!
-------葛周,纽约大学博士
我们很乐意提供反馈。PolyJet在HepG2细胞中工作得很好,我们使用pMAX GFP质粒获得了大约80%的效率,遵循您建议的方案中的条件。我们与Lipofectamine进行了比较,其转染效率仅约为20-30%。我们正在计划试验,很快就会订购更多。
——艾米丽·麦卡利斯特,PBRC