佩普穆特� siRNA转染试剂

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  • 单位尺寸:1.0毫升

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佩普穆特� siRNA转染试剂

说明:
佩普穆特� siRNA转染试剂由病毒细胞穿透肽(CPPs)模拟而成,是一种全新的siRNA传递工具,在各种哺乳动物细胞中1nm siRNA的沉默效率超过95%.利用我们专有的肽模拟技术(PST),我们模拟、合成了数百种病毒CPP,并在多种哺乳动物细胞中筛选基因传递效率(图1)。佩普穆特� 然后,该试剂被鉴定并验证为浓缩和转染短(100 bp以下)单链或双链核酸的非常有效的载体是这样的作为siRNA,miRNA模拟和DNA寡聚物作用于广泛的哺乳动物细胞。

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图1。一幅卡通画� 用PST法建立siRNA转染试剂

尺寸:
-佩普穆特� 试剂,1.0 mL,足以在24孔板中转染0.5~5.0 pmol siRNA或miRNA模拟物进行~1333个反应
-打气
沉默的� 转染缓冲液(5x),为获得最大转染效率而配制,在5倍浓缩储备溶液中加入8.0 mL,制成40 mL工作溶液

应用:
-siRNA-miRNA模拟或mRNA转染
-DNA/siRNA共转染
-DNA寡核苷酸转染

存储:

4号店�C代表PepMute� PEPSUTE试剂和RT� 转染缓冲液(5x). 如果储存得当,产品可稳定12个月或更长时间。

优势:
-在最终1.0 nM siRNA上的出色沉默
-多种细胞中95%以上的基因沉默
-采用简易标准方案的单管反应
-与血清和抗生素相容
-适用于HTS的协议
-极低的细胞毒性
-非常实惠

pepstute与pepstute的沉默效果比较� siRNA转染试剂及主导产品
精神分裂症与精神分裂症
图2。在HEK293细胞中以1.0�佩普穆的l
te� 试剂和0.5 pmol EG5 siRNA每孔24孔板。KIF11(也称为EG5)编码属于蛋白质的运动蛋白质驱动蛋白样蛋白家族参与细胞有丝分裂过程中染色体定位和双极纺锤体形成。KIF11水平的降低导致有丝分裂停止。佩普穆特� 试剂有效地将EG5 siRNA(最终1.0 nM)传递到HEK293细胞,在转染48小时后,与阴性对照(最终1.0 nM假EG5 siRNA)相比,HEK293细胞的“取整”表型超过80%,同时引导siRNA转染试剂Lipofectamine� RNAiMAX(RNAiMAX,1.0 nM EG5 siRNA)/干扰素(1.0 nM EG5 siRNA)/达尔菲(10.0 nM EG5 siRNA)和JetTime(20 nM EG5 siRNA)在HEK293细胞上的平均球形表型分别为37%、23%、53%和48%。转染后48小时,用尼康显微镜观察“向上取整”的293细胞的表型(上图)并进行定量(下图)。

Pepmuet_vs_RNAiMAX_Dharmafect
图3。pepstute的消声效率比较� 转染试剂(上面板),含达尔马克试剂4(中面板)和脂质体
E� A549细胞上的RNAiMAX(RNAiMAX,下面板)siRNA转染试剂。
以不同终浓度(0.5-20 nM)的雷尼拉荧光素酶为靶点的siRNA与雷尼拉荧光素酶基因(0.5 nM)共转染�根据制造商的协议,将上述三种转染试剂注入生长在24孔板上的A549细胞中,每孔pRL CMV DNA g)。用雷尼拉荧光素酶测定系统(Promega)共转染36小时后测定雷尼拉荧光素酶活性。发光s从5.0开始测量�在与光度计(Beckman Coulter LD 400)集成10 s的过程中,1 l裂解物。荧光素酶活性表示为积分超过10秒的光单位(RLU),并标准化为每毫克用BCA法测定细胞蛋白的含量。误差条表示从三次试验中得出的标准偏差。萤光虫相对于未处理的细胞计算硒沉默效率。虽然佩普穆特� 佛法效果� 4种试剂从1.0 nM的renilla荧光素酶siRNA产生显著的基因沉默,脂质体胺� RNAiMAX仅在20nm后才产生良好的敲除作用,而在低浓度siRNA(分别为0.5和1.0nm)下观察到基因表达增强。

PepMute_GFP_siRNA_MCF7
PepMute_GFP_siRNA_U2OS

图4。佩普穆特� 转染试剂通过分别反向转染5.0和1.0 nM GFP siRNA,在MCF7细胞(上图)和U2OS细胞(下图)中下调稳定的GFP表达。绿色荧光蛋白(GFP)在MCF7和U2OS细胞中稳定表达。将靶向GFP基因的siRNA(右图)和假siRNA(左图)分别以5.0和1.0 nM的末端导入MCF7和U2OS细胞PepMute反向转染� 转染试剂。绿色荧光蛋白基因沉默在转染后48小时通过尼康荧光显微镜进行监测。定量分析表明PepMute提供的5.0和1.0 nM GFP siRNA� siRNA转染试剂分别使MCF7和U2OS细胞中稳定表达的GFP下降90%和95%。

数据表和协议
-标准siRNA转染方案
-标准siRNA/DNA共转染方案
-HTS的反向siRNA转染方案

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要求免费试用样品


证明:

我曾在原代视网膜神经元上试用过你们的产品pepMute转染试剂,对转染效率感到满意。我要点菜!

-路易斯安那州立大学Vijai Krishnan博士


非常感谢你给我寄来一份PepMute siRNA试剂的样品。我用293T细胞测试了DNA/siRNA共转染,结果完全令人满意。我能够在1.0nM siRNA处获得95%的靶基因敲除,并使用推荐的方案获得质粒DNA的表达。我将不得不测试,看看其他细胞系是否也同样有效。我一定会考虑改用这种试剂而不是达摩净或寡精胺。

-哈里什·拉马纳森博士,国立卫生研究院NIDDK


我试过了,我喜欢。它有如此高的效率和无细胞毒性。我要用它。谢谢你把它介绍给我们的实验室。

-拉德米拉·赫德利科娃,奥斯汀大学博士


在A2780细胞上尝试了3种不同的siRNA,100%沉默。太棒了!我已经下订单了。

-多丽丝·本布鲁克,博士,奥汉斯大学

是的,我确实使用了你慷慨地寄给我们的那个样品� 它在HepG2细胞上非常有效,因此我订购了一个全尺寸的,并且专门用于siRNA!我比较了RNAiMAX和罗氏�s X基因产物,但这些产物不如PEPSUTE有效。再次感谢您的样品。太棒了!

-美国农业部马修·杰克逊博士




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