LipoJet� 体外转染试剂盒(II版)
说明:
基于我们的创新和专有脂质结合技术,LipoJet™ 转染试剂盒,由新型含氟阳离子脂质显示出oth的显著优势市场上的脂质转染试剂。LipoJet™转染试剂盒是最强大但非常温和的基因传递工具,适用于各种应用,包括大多数哺乳动物细胞类型的质粒DNA和/或siRNA。C与市场领先产品相比,LipoJet™ 更多成本效益高,始终提供较高的转染效率和较少的细胞毒性。
包内容:
-LipoJet™ 试剂,1.0 ml,足以进行1000次DNA转染和1000次siRNA转染(24孔板)。
-LipoJet™ 转染缓冲液(5倍),8.0毫升,制成40毫升工作溶液(1倍)。
特征:
-用途广泛:DNA转染、siRNA转染和DNA/siRNA共转染。
-强大的:对贴壁细胞有卓越的功效。
-极低毒性:提高转染后细胞活力
-经济:用更少的试剂进行更多的转染
-易于使用:单管反应,与血清/抗生素兼容。
-适用于高通量应用
存储:
4号店�C代表LipoJet� LipoJet试剂与RT� 转染缓冲液(5x)。如果妥善储存,产品可稳定12个月或更长时间。
哺乳动物细胞类型的广泛转染谱
细胞系 |
DNA转染 |
siRNA转染 |
293293T 3T3,NIH 3T3 3T3-L1 A549 B16-F10 BNLCL.2 C2C12 C3H/10T1/2 碳酸钙-2 大鼠原代心肌细胞 首席人事官 COS1 COS7 人膀胱癌细胞 市场经济地位 伊梅夫 HBEC HCT116 希拉 HepG2 HT-29 哈-7 LNCaP MC3T3-E1 MCF10A MCF7 MDA-MB-231 MDCK MEF 人原代黑素细胞 人原发性黑色素瘤 人永生化小胶质细胞 mIMCD-3 MRC-5 N2A PC3 生264.7 RPE SH-SY-5Y SK-OV-3 U-2OS 维罗 为其 |
85% 65% 30% 80% 75% 55% 80% 60% 20% 10% 80% 70% 75% 80% 50% 55% 45% 75% 80% 60% 45% 45% 45% 50% 40% 50% 50% 20% 50% 50% 50% 50% 50% 50% 68% 70% 45% 30% 75% 70% 80% 40% 70% |
- 20纳米时为90% - 10纳米时为90% - - 10纳米时为90% - 20纳米时为80% - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 在30 nM处85% 在30 nM处85% - - - - - - - - 在25纳米时为90% - - - 40纳米时为90% |
显示LipoJet的优秀DNA和siRNA转染效率的示例™ 体外转染试剂盒
LipoJet的效率比较™ 用于转染Hela、Cos-7、NIH-3T3、CHO和HEK293(左面板)和Cos-7(右面板)的试剂与品牌产品。pEGFP-N3 cDNA(0.5µg/孔24孔板)在制造商推荐的血清(10%FBS)和抗生素存在下,按照标准转染方案转染到不同的哺乳动物细胞中。转染48小时后通过流式细胞仪分析转染效率。
LipoJet的毒性比较™ 转染Hela细胞的试剂与品牌产品。pEGFP-N3 cDNA(1.0µg/孔24孔板)在制造商推荐的血清(10%FBS)和抗生素存在下,按照标准转染方案转染到Hela细胞。MTT法(右图)和相位对比成像法(左图)用于分析转染后48小时的细胞活力。
LipoJet的比较™ 试剂与Lipofectamine 2000(L2K)和PolyJet™ HEK293T细胞上的转染试剂。pEGFP-N3 cDNA(24孔板每孔0.125µg/well, 0.25µg/well和0.5µg/well)使用LipoJet™(LipoJet上面板)在血清(10%胎牛血清)存在的情况下,使用标准转染协议转染到293T细胞中™/DNA(微升/微克)比率=2),L2K(中间板atl2k/DNA(微升/微克)比率=3)和PolyJet™ (PolyJet处的下面板™/脱氧核糖核酸(微升/微克)分别率= 3)。转染48小时后尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞形态。
LipoJet的比较™ 试剂与Lipofectamine 2000(L2K)和PolyJet™ Hela细胞转染试剂。pEGFP-N3 cDNA(0.125µg/孔、0.25µg/孔和0.5µg/孔24孔板)在血清(10%FBS)存在下,通过LipoJet,使用标准转染方案转染到Hela细胞中™ (LipoJet处的上面板™/DNA(微升/微克)比率=2),L2K(中间板atl2k/DNA(微升/微克)比率=3)和PolyJet™ (PolyJet处的下面板™/脱氧核糖核酸(微升/微克)分别率= 3)。转染48小时后尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞形态。
LipoJet基因异常沉默™ 哺乳动物细胞DNA/siRNA共转染期间的试剂。转染GFP的cDNA(左面板,0.25µg / 24-well板)和co-transfection GFP cDNA(0.25µg / 24-well板)和GFP目标核(最后10 nM,右面板)LipoJet™试剂导致异常基因沉默在HEK293(上半部分),海拉(中间面板)和SaoS-2(下图)细胞分别。转染48小时后尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞形态。
HUVEC上DNA/siRNA共转染效率优异。Co-transfection mCherry cDNA(0.10µg / 24-well板)和FITC共轭核(最后30 nM / 24-well板)与LipoJet HUVEC™试剂给上升到60% mCherry +(相衬与mCherry重叠成像,左面板)和近100% FITC-siRNA +(相衬和FITC重叠成像,右图)转染24小时后的HUVEC。这些照片是由南加州大学潘孔博士提供的。
利用LipoJet对HEK293(上图)和Hela(下图)细胞中内源性表达的KIF11(也称为EG5)进行极好的沉默™ 10纳米EG5 siRNA的试剂。KIF11(也称为EG5)编码一种运动蛋白,属于驱动蛋白样蛋白家族,参与细胞有丝分裂期间染色体定位和双极纺锤体形成。KIF11水平的降低导致有丝分裂停止。LipoJet™ 试剂有效地将EG5 siRNA(最后10 nM)递送至HEK293和Hela细胞,导致转染24小时后HEK293和Hela细胞80%以上的“取整”表型超过阴性对照(最后10 nM为假EG5 siRNA)。转染24小时后,在尼康显微镜下观察“取整”HEK293和Hela细胞的表型。
显示LipoJet异常转染效率的图像� 转染试剂盒在人胚胎干细胞(HESC)。这个人胚胎干细胞在Geltrex上E8培养基中生长用pEF1转染vs(左面板,DIC成像)α-绿色荧光蛋白。转染24小时后,通过Nikon Eclipse荧光显微镜观察GFP表达(右图)。以上图片是由博士玛丽娜·普里日科娃约翰霍普金斯大学的教授
数据表和协议:
-DNA和siRNA转染方案
-DNA转染的一个简短方案
-siRNA转染的一个简短方案
-DNA/siRNA共转染方案
-技术说明和转染提示
我们是阿弗林g向购买5x1.0 mL LipoJet的客户提供“无线PowerPoint演示文稿”™ 2014年12月之前。好好利用它,不要错过这个机会。。。
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FG-3:无线PowerPoint演示文稿,带购买5 X 1.0 ml或以上的包装盒。此演示者仅提供有限的时间! |
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证明:
很抱歉耽搁了这么久,但现在我完全爱上了PolyJet和LipoJet。最近,我们发现LipoJet对MESC和HESC的转染效率非常高,毒性小得多。上周,我用LipoJet以同样惊人的高效率(高达50~70%)转染过夜的人类ESC系H1。DNA结构包括EF1a启动子下的GFP(CMV启动子在HESC中不起作用)这是我见过的ESCs的最佳转染效率。Lipofectamin 3000没有给我这些结果(用于小鼠ESCs)。
--------马里娜·普列日科娃博士,JHU
我用LipoJet样本在EAhy926细胞(HUVEC细胞系)中尝试了质粒/siRNA共转染。结果非常好,至少在转染效率方面是如此。对于质粒转染,48小时后,大约60%的细胞被转导。对于siRNA,效率几乎是100%。我们订购了更多的LipoJet试剂用于我现在。
南加州大学潘光教授
在293T细胞上,LipoJet的>效率为90%,而X-tremeGENE 9的效率为80%。肯定会订购更多的....
-----Roswell Park癌症研究所的Nuo Yang博士
以下是我们对LipoJet的初步实验结果。我们对它的效率非常满意。不幸的是,我们没有Fugene 6/HD,无法同时测试它们,但根据以前的经验,我们确实相信您的产品工作效率更高。
------匹兹堡大学的Alison McKelvey博士
我很高兴地说,我在OKF6/TERT2人类角质形成细胞的转染试剂方面取得了巨大成功。我将在完成分析后整理数据。我真的很喜欢LipoJet。我感兴趣的细胞在GenMute中做得不太好,尽管我的对照细胞做得很好。我们希望尽快订购。我还有一张优惠券采购订单的10%。
-----UPMC的Michelle Simpson Abelson博士
我们确实用自制的CaPhos对它们进行了测试。结果非常好,LipoJet和CalFectin都做得非常好。LipoJet是两者中的佼佼者。我拿到结果后会将结果发送给你,我目前不在实验室,但我们肯定会订购更多。感谢你发送这些样品。
------Ahmed Hassib博士,康奈尔大学
对于LipoJet,我只将其与Hela细胞中的Lipo LTX进行了比较。转染24小时后,LipoJet的效率要高得多(比Lipo LTX高约35%)。我们要订购一些LipoJet。
-----来自南加州大学的测试人员