�LipoD293体外DNA转染试剂

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LipoD293 - DNA体外转染试剂

描述
通过利用我们的创新和专有的脂质偶联技术,LipoD293�II)特别设计和配方,添加专有增强子转染HEK293细胞和其他哺乳动物细胞(图1)。II)对HEK293相关细胞以及许多细胞毒性较小的哺乳动物细胞具有极高的转染效率。LipoD293�试剂(版本。II)在原有版本的基础上进行了改进,在基因传递方面的效率提高了3~4倍。LipoD293�试剂(版本。II), 1.0 ml足以在24孔板上进行~666次转染,或在6孔板上进行~333次转染。

How_LipoD293_Works
图1所示。LipoD293卡通显示(二)基因传递增强

特性
-难以转染细胞的首选
-病毒产生的滴度异常高
-对于非常长的dna同样有效(高达180 kb)
-同样适用于悬浮293细胞(如293F, 293H等)
-高水平的重组蛋白生产
-血清和抗生素的存在提高293细胞的效率
-单一DNA转染和多DNA共转染都具有极高的效率
——非常负担得起的

储存条件
4欧元商店。如果储存得当,该产品可以稳定12个月或更长时间。

LipoD293 - DNA体外转染试剂转染效率的比较二)具有品牌名称的产品
LipoD203_vs_Lipo2000_HepG2
LipoD293试剂转染效率的比较II)与lipofectamine 2000 (L2K)和Fugene HD在HepG2细胞上的比较。
右图:LipoD293转染效率比较II)用Lipofecatmine 2000 (L2K)和Fugene HD作用于HepG2细胞。使用不同的转染试剂将GFP DNA (pEGFP-N3)转染到HepG2细胞(在胶原蛋白预处理的培养皿中培养)。转染48小时后通过流式细胞仪检测GFP阳性细胞(%)和荧光强度
左图:血清和抗生素的存在增强LipoD293 (Ver。II)对HepG2细胞的效率。HepG2细胞(生长在胶原蛋白处理的培养皿上)转染三种不同的条件:-------血清和抗生素不含,10%血清和抗生素存在后转染5小时后去除,10%血清和抗生素存在后转染5小时后不去除。

LipoD203_vs_Lipo2000_CHO
LipoD293试剂转染效率的比较II)与lipofectamine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6在CHO细胞中的作用。
右面板:LipoD293 (Ver。II)用Lipofecatmine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6作用于CHO细胞。分别用不同的DNA转染试剂对编码Renilla荧光素酶(phRL-CMV)和GFP (pEGFP-N3)的DNA进行转染。转染24小时后,分别用Renilla Assay System和Nikon Eclipse荧光显微镜检测Renilla荧光素酶活性和GFP荧光。
左面板:比较LipoD293与Lipofecatmine 2000 (L2K)、TransIT和Fugene 6的价格($/1.0 ml小瓶)。所有的价格都是从制造商的网站上收集的。

LipoD203_vs_Lipo2000_SMC
比较LipoD293与lipofectamine 2000 (L2K)在难以转染的大鼠主动脉平滑肌细胞上的转染效率。分别用LipoD293试剂(左图)和Lipofecatmine 2000(右图)制备大鼠主动脉平滑肌细胞,并用pEGFP-N3转染。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光,评估转染效率。以上图片由芝加哥大学肺危重科Nickolai Dulin博士提供。

LipoD203_vs_FugeneHD_LNCap
LipoD293�试剂与Fugene HD在难转染细胞LNCap上的转染效率比较按照ATCC推荐的方法培养LNCap细胞,并按照制造商的协议分别用pBabe-hygro-SSeCKs (1.5ug)和pEGFP-N3 (0.5ug)共转染每孔(6孔板)LipoD293�试剂(左图)和Fugene HD(右图)。转染24小时后,用尼康Eclipse 2000显微镜检测GFP荧光,评估转染效率。以上图片由罗斯威尔帕克癌症研究所高琳博士提供。

LipoD203_HepG2_SaoS-2
两个例子显示了LipoD293试剂在HepG2和SaoS-2等难转染细胞上的卓越效率。HepG2和SaoS-2细胞转染pEGFP-N3和pSV-?-半乳糖苷酶dna分别存在于血清/抗生素。转染48小时后分别用Zeiss 510共聚焦显微镜和?-半乳糖苷酶染色试剂盒检测转染效率。

LipoD203_vs_293fectin_HEK293_I
LipoD203_vs_293fectin_HEK293_II

LipoD293和293fectin转染HEK293细胞的效果比较。用LipoD293转染pEGFP-C1质粒的HEK293细胞。二)(上图)和Invitrogen公司最受欢迎的品牌产品293fectin�(下图)。转染24小时后,尼康Eclipse荧光显微镜观察细胞的DIC相位成像(左图)和FITC相位成像(右图)。

LipoD203_vs_293fectin_HEK293_II

比较LipoD293 -试剂与293fectin、Xfect和Fugene 6转染试剂对293F细胞悬浮蛋白生产的影响。30毫升的在标准培养基中培养的293F细胞,用LipoD293 - 96t转染pEGFP-6xHis质粒。II) (20 ug质粒DNA), 293Fectin (30 ug质粒DNA), Xfect (30 ug质粒DNA)和Fugene 6 (30 ug质粒DNA)每个制造商的标准转染协议。转染48小时后可见GFP荧光(左图),A代表LipoD293, B代表293fectin, C代表Xfect, D代表Fugene 6。然后纯化6xHis标记的GFP蛋白
一个Ni-NTAaffinity列。用SDS-PAGE分离第1洗脱馏分5 ul,考马斯亮蓝染色(右上图E),第1道为LipoD293,第2道为protein marker,第3道为Xfect,第4道为293fectin,第5道为Fugene 6。通过分光光度计定量测定蛋白质产量(右下F图)。

LipoD203_vs_LTX_Lentivirus_Yield_II
LipoD203_vs_LTX_Lentivirus_Yield
LipoD293的比较II)和Lipofecatmine LTX (LTX)对慢病毒(LV)的产生作用。用LipoD293�(Ver.)共转染3种cdna。II)和Lipofectamine LTX (LTX)进入293FT细胞。用GFP载体phrsin -cppt- cmvewp测定LV滴度。每孔1 × 105 293F细胞被镀到24孔板上,然后加入不同数量的载体上清液,分别为1微升(上板)和10微升(下板)。5天后,用流式细胞术传代细胞。右上角的数字表示转导细胞的百分比。LipoD293和L2K产生的LV滴度分别为8 × 10^6和3 × 10^6 tu/ml

技术信息及数据表
-LipoD293�(版本。II)试剂通用协议和数据表

-LipoD293�(版本。(二)试剂短协议
-LipoD293�(版本。(二)转染悬浮293和CHO细胞的试剂方案

-LipoD293�(版本。(二)慢病毒生产试剂

-LipoD293�(版本。(二)rAAV生产试剂
-技术说明和转染技巧



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奖状
我绝对激动与LipoD293转染试剂!我比较了LipoD293和Lipofectamine转染质粒,产生病毒伪粒子,哇!我用LipoD293试剂比Lipofectamine回收的病毒多4倍!!这对我和我的导师来说都是好消息,因为这意味着我不需要花那么多时间(和资源)转染293T细胞来恢复用于体外实验的病毒。我的导师也很高兴LipoD293比Lipofectamine便宜得多!!我们已经订购了5毫升的LipoD293,我现在已经说服我的实验室同事改用LipoD293,因为我用它得到了如此好的结果。谢谢你做出这么棒的产品!
--------克里斯蒂·拉文,哈佛大学博士

我想更新一下你发给我们的LipoD293免费样品。我最近用Lipofectamine 2000同时转染了一些铂- e,你们的产品表现比它更好!!我们也在用海拉细胞验证它,但除此之外,我们对目前所看到的非常满意!谢谢你寄给我们免费样品,它肯定为我们带来了销售!
--------Catherine Gallo,博士,辛辛那提大学

我们已经在293FT细胞上尝试了LipoD293 DNA体外转染试剂。在第一个瓶中,我们使用了由Invitrogen公司提供的Virapower盒子插入(Virapower, pbaby - gfp质粒,加上Lipofectamine)。在第二个烧瓶中,我们使用LipoD293 (30 ul/6ml培养基),与第一个烧瓶中相同数量的Virapower和质粒。结果令人震惊:LipoD293产生的转化子是Lipofectamine 2000的两倍……
--------韦恩州立大学的测试员



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