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shRNA/miRNA rAAV包装,大规模
目录#:SL100872
单位大小:1.0 mL (10
13
VG /毫升)
大规模包装shRNA/miRNA AAV
特点:
-在大多数细胞类型中,包括分裂细胞和未分裂细胞或原代细胞,具有优良的基因传递效率。
——多个血清型
(AAV-1、AAV-2、AAV-3、AAV-4、AAV-5、AAV-6、AAV-8、AAV-9、AAV-DJ/8、AAV-DJ)
.
-持久的转基因表达。
-诱导有效的基因沉默。
服务描述:
-大规模共转染AAV HT 293细胞到2xcell stack。
-收获rAAV,然后通过2xCsCl超离心纯化。
-通过qPCR滴定(测量基因组拷贝数)。
我们提供的rAAV血清型:
Aav-1, aav-2, aav-3, aav-4, aav-5, aav-6, aav-7, aav-8, aav-9, aav-php。B, AAV-PHP。eB、AAV-DJ/8和AAV-DJ
.
所需材料:
rAAV
独联体
携带shRNA或pre-miRNA的质粒,>300
�
g。
周转时间:
1 ~
2周。
可交付成果:
>1.0 mL超纯化的体内级rAAV载体>1E+13 VG/mL*。
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我们也提供截短的定制shRNA AAV服务
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图1所示。对不同来源的rAAV载体的纯度和传染性进行了比较,结果显示,通过我们先进的双CsCl超离心方法制备的rAAV载体具有超纯度和超传染性(接近临床试验级别)。
A. SDS-PAGE分离不同来源的rAAV载体(共1E+9 VG / lane),然后银染色。Lane 1: GMP生产的CHOP rAAV载体;2车道:采用先进的2xCsCl超离心方法制备的rAAV;Lane 3:来自BCM Vector Core的rAAV;第四道:我们的竞争对手“V”的rAAV;5道:我们的竞争对手C的rAAV;第六道:蛋白质标记。
B.通过先进方法制备的超级传染性rAAV载体
双中海ultra-centrifugation
.左面板:我们的竞争对手“V”注入小鼠眼的rAAV9-GFP(共5E+9 VG);右图:经高级2xCsCl纯化的rAAV-9-GFP(共5E+9 VG)
ultra-centrifugation
注射到老鼠的眼睛。
图2。对不同来源的rAAV载体的传染性进行了比较,结果表明采用先进的双CsCl超离心方法制备的超纯化rAAV具有超强传染性。
将不同来源的rAAV1-GFP(总2E+9 VG)注射到小鼠肌肉组织。注射后3周观察GFP荧光。A.竞争对手“V”的rAAV1-GFP;B. rAAV1-GFP,来自我们预先制作的rAAVs库存,通过高级纯化
中海ultra-centrifugation两倍。C。
定量数据表明,我们的超纯化rAAV (bar 2)比常规CsCl超离心制备的(bar 1)传染性高约9倍。
*最终的病毒产量可能取决于转基因的性质。
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